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背景和目的目前冠状动脉造影技术作为冠心病（Coronary heart disease，CHD）诊断金标准，属于有创性诊断技术，不良反应较多；64层螺旋CT和双源CT用于无创评价冠心病患者冠脉的病变情况，但价格昂贵，难以全面推广和普及。有临床流行病学调查表明血液非对称性二甲基精氨酸分子（Asymmetricdimethylarginine，ADMA）含量增高可能为心血管疾病的危险因素，并且与冠心病危险程度相关。目前ADMA分子的检测方法不能满足临床检测要求，限制了该分子的临床应用。我们研究团队正在建立可用于临床检测该分子的酶联免疫分析方法，本研究则建立测定ADMA分子的高效液相色谱方法，以期为酶联免疫分析法检测ADMA分子的试剂盒做评价，同时也可以为临床检测、研究该分子做准备。同时，我们在35项血液生化指标中寻找CHD组与非冠心病（Non-coronary heart disease，NCHD）组间的差异指标，建立诊断模型，以期用于行冠状动脉造影检查之前的初筛，降低冠状动脉没有实质性病变的人群行冠状动脉造影的风险。对象与方法根据拟定的纳入和排除标准，选取研究对象398例，入选病例行冠状动脉造影检查分为CHD组（114例）和NCHD组（284例）并记录Gensini积分，冠心病组根据冠状动脉的病变支数分为单支病变组（Single-vessel CHD）、双支病变组（Double-vessel CHD）和三支病变组（Three-vessel CHD），其中双支病变组和三支病变组统称为多支病变组（Multi-vessel CHD）。血清ADMA、对称性二甲基精氨酸分子（Symmetric dimethylarginine，SDMA）采用高效液相色谱法检测；35项生化指标采用罗氏公司COBAS8000全自动生化分析检测。使用SPSS19.0软件用于数据分析。正态定量数据两组间比较用T检验，多组间比较采用方差分析；非正态或方差不齐的资料两组间比较采用非参数U检验，多组间比较采用非参数H检验，组间的两两比较采用推广了的t检验。计数资料分析采用χ2检验。P<0.05有统计学意义。35项指标中筛选出差异指标用于多因素Logistic回归（Multivariate Logistic regression）和逐步判别分析（Stepwise discriminant analysis），建立区分CHD组与NCHD组数学分类模型。结果一、建立了基于高效液相色谱技术的血清ADMA分子检测方法，可同时检测精氨酸（Arginine， Arg）、高精氨酸（Homoarginine，H-Arg）及SDMA。4种待测标准品标准曲线的决定系数R2>0.999；两个水平的加样回收率范围88.7%～110.2%，且差异无统计学意义；批内、批间变异系数分别低于5%和7%；最低检测限Arg为0.02μmol/L，H-Arg、ADMA及SDMA为0.01μmol/L；最低定量限Arg为0.05μmol/L，H-Arg、ADMA及SDMA为0.03μmol/L。二、ADMA和SDMA与CAG病变支数及Gensini积分的相关性分析。与NCHD组比较，CHD组ADMA与SDMA增高，具有显著的统计学差异。ADMA及SDMA在冠心病单支病变组、多支病变组间差异无统计学意义。ADMA及SDMA与冠脉病变支数及Gensini积分之间存在弱相关，相关性检验有统计学意义。三、常规生化指标在冠心病诊断中的价值评价。与NCHD组比较，ALT、GGT、TNT、UN、Cr、UA、APOA1、P、HDL、LP(a)、Na及NTBNP共12项指标差异具有统计学意义，而且TNT及NTBNP在多支病变组高于单支病变组，差异具有统计学意义。利用SPSS19.0软件对差异指标进行多因素分析，建立CHD组与NCHD组鉴别诊断模型。经二元Logistic回归分析，最终有5个参数（APOA1、P、LP(a)、Cr和GGT）进入方程（Y=logit(P)=3.202-2.892*APOA1-1.603*P+0.012*GGT+0.064*LP(a)+0.021*Cr），保存预测概率P，做ROC（Receiver operating characteristic，ROC）曲线分析，5个参数联合检测鉴别CHD组和NCHD组的曲线下面积（Area under curve，AUC）为0.766，敏感性为83.4%，特异性为57.0%；判别分析的入选参数同Logistic回归分析一致，建立判别方程P=eb/(eb+ec)b=35.230*APOA1+25.825*P+0.000*GGT+0.052*LP(a)+0.413*Cr-51.825c=38.260*APOA1+27.605*P-0.010*GGT+0.009*LP(a)+0.392*Cr-59.865保存预测概率P，做ROC曲线分析，AUC为0.762，敏感性为76.0%，特异性为66.7%。两种多参数分析方法经z-score检验，AUC无统计学差异。利用判别方程对398例研究对象重新诊断分组，总准确度为67.9%，敏感性为66.5%，特异性为69.3%。结论建立了基于高效液相色谱技术的血清ADMA分子检测方法，可同时检测精氨酸（Arginine， Arg）、高精氨酸（Homoarginine，H-Arg）及SDMA分子。经过系统的方法学评价表明，结果准确，可用作比较ADMA分子检测方法的参考，也可用于临床检测、研究该分子。CHD组血清ADMA、SDMA水平显著高于NCHD组，且与冠状动脉的病变程度、Gensini积分有一定的相关性，相关性检验有统计学意义。血液ADMA、SDMA分子浓度增高可能为冠心病的危险因素。建立了鉴别诊断冠心病的外周血多参数Logistic回归分析模型和判别分析模型，有望用于冠脉造影前的初筛检查。