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目的:通过建立动物缺血性脑卒中模型,从行为学、形态学及分子生物学等多个层面,观察不同剂量丁苯酞对缺血性脑卒中大鼠认知功能及脑灌注的影响,为临床丁苯酞治疗缺血性脑卒中提供理论依据。方法:清洁SD大鼠25只均为雌性,体重约为250～280 g。所有大鼠相同条件下饲养。动物由河北医科大学动物研究中心提供。将25只大鼠从1号随机编到25号,通过随机数字表抽25个数,按从大到小顺序排列,均建立缺血性脑卒中模型,随机分为5只为一组,共四组,分别为丁苯酞低剂量组(A组)、丁苯酞中剂量组(B组)、丁苯酞高剂量组(C组)、未使用丁苯酞治疗组(D组)。另5只为对照组即假手术组。行为学观察:滚轴实验、改良大鼠神经功能缺损评分(modified Neurological Severity Score,m NSS);缺血灶体积的统计、脑血流量监测;分子生物学观察:Real Time PCR检测及免疫荧光法测定Caspase-3,测定3-NT、e NOS及脑组织NO水平。结果:1.滚轴实验结果显示:在术前五组大鼠从开始至跌落下转轮的时间差异无统计学意义。对照组即假手术组术后3天、术后7天、术后14天落下转轮的时间与术前差异无统计学意义,其它四组手术后术后3天、术后7天、术后14天落下转轮的时间与术前相比均下降。D组未使用丁苯酞治疗组,术后3天、术后7天、术后14天三个时间段差异无统计学意义,且均低于三种剂量丁苯酞组。三种剂量丁苯酞组经丁苯酞治疗后,落下转轮的时间均有提高,即三种剂量的丁苯酞均明显促进神经功能恢复。然而,A、B、C三组同一时间上三组比较:术后3天,三组间差异无统计学意义,术后7天,B组落下转轮的时间明显高于其他两组,而A、C两组间差异无统计学意义。术后14天,B组落下转轮的时间明显高于其他两组,而A、C两组间差异无统计学意义。同一组别不同时间比较:三组均为术后7天、14天明显高于术后三天,A、C两组术后7天、14天落下转轮的时间差异无统计学意义,B组术后14天落下转轮的时间明显高于术后7天相比,随着使用时间的延长,落下转轮的时间也随之提高。2.改良大鼠神经功能缺损评分结果显示:在术前五组大鼠m NSS评分差异无统计学意义,均为0分。对照组即假手术组术后3天、术后7天、术后14天m NSS评分与术前差异无统计学意义均为0分,其它四组手术后术后3天、术后7天、术后14天m NSS评分与术前相比均提高。D组未使用丁苯酞治疗组,术后3天、术后7天、术后14天三个时间段差异无统计学意义,且均高于三种剂量丁苯酞组。三种剂量丁苯酞组经丁苯酞治疗后,m NSS评分均有下降,即三种剂量的丁苯酞均明显促进神经功能恢复。然而,A、B、C三组同一时间上三组比较:术后3天,三组间差异无统计学意义,术后7天,B组m NSS评分明显低于于其他两组,而A、C两组间差异无统计学意义。术后14天,B组m NSS评分明显低于其他两组,而A、C两组间差异无统计学意义。同一组别不同时间比较:三组均为术后7天、14天明显低于术后三天,A、C两组术后7天、14天m NSS评分差异无统计学意义,B组术后14天m NSS评分明显低于术后7天相比,随着使用时间的延长,m NSS评分也随之降低。3.脑缺血灶体积比较:术前各组大鼠均无脑缺血体积灶,对照组术前、术后14天缺血灶体积无变化,术后14天,D组脑缺血灶体积最高,其次为A、C两组,且A、C两组间差异无统计学意义,B组缺血灶体积最低,差异具有统计学意义(P<0.05)。4.脑血流量比较:术前各组大鼠均无缺血体积灶,脑血流量正常,对照组术前、术后14天脑血流量无变化,术后14天,B组脑血流量最高,其次为A、C两组,且A、C两组间差异无统计学意义,D组脑流量最低,差异具有统计学意义(P<0.05)。5.Real Time PCR检测Caspase-3 m RNA的表达显示:对照组术前、术后14天表达差异无统计学意义,术后14天A、B、C、D四组Caspase-3m RNA的表达均高于术前,四组间两两比较:术前各组大鼠表达差异无统计学意义,术后14天,D组表达量最高,其次为A、C两组,且A、C两组间差异无统计学意义,B组脑流量最低,差异具有统计学意义(P<0.05)。6.免疫荧光法测定Caspase-3蛋白表达的阳性率显示:对照组术前、术后14天阳性率差异无统计学意义,术后14天A、B、C、D四组Caspase-3阳性率均高于术前,四组间两两比较:术前各组大鼠阳性率差异无统计学意义,术后14天,D组阳性率最高,其次为A、C两组,且A、C两组间差异无统计学意义,B组阳性率最低,差异具有统计学意义(P<0.05)。7.3-NT、e NOS、NO的测定结果变化规律一致,对照组术前、术后14天3-NT、e NOS、NO的测定结果差异无统计学意义,A、B、C、D四组术后14天3-NT、e NOS、NO的测定结果均高于术前,术前各组3-NT、e NOS、NO的测定结果差异无统计学意义,术后14天,组间比较:D组3-NT、e NOS、NO的测定结果最高,其次为A、C两组,且A、C两组间差异无统计学意义,B组3-NT、e NOS、NO的测定结果最低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:动物模型表明丁苯酞能够改善大鼠缺血性脑卒中认知功能及脑灌注量,而且中剂量组效果最佳。