N-对甲苯磺酰-L-丙氨酰氧吲哚的合成及其应用

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在现有检测尿液白细胞的产品中,通常使用吡咯酯或吲哚酯作为化学反应底物。目前国内吡咯酯的供应商很少,而且价格非常昂贵,而吲哚酯没有供应商可以提供。因此这两种酯的合成,对于高效检测白细胞显得尤为重要。本文根据参考文献,对吡咯酯的合成路线进行了研究和优化,以肉桂酸为起始原料,经过环氧化反应、亲核取代反应、缩合成环、水解、酯化反应得到目标产物。根据文献制备的吡咯酯外观为粉色粉末状固体,纯度为94.89%,用于白细胞检测时会产生假阳性,因此本文通过活性炭脱色和甲苯重结晶,对吡咯酯进行精制,得到白色粉末状固体,纯度达到99.08%,有效地消除了假阳性。同时,合成了吲哚酯重要的中间体3-羟基吲哚。以邻氯苯甲酸为起始原料,经Ullmann缩合,乙酸酐保护,缩合成环,加热脱羧,异构化,再乙酰化保护得到二乙酸吲哚酯,最后再水解得到3-羟基吲哚。3-羟基吲哚对空气非常敏感,不适合进一步纯化,本文将二乙酸吲哚酯通过柱层析,并在AcOEt/PE下重结晶进行纯化,水解后得到高纯度的3-羟基吲哚,纯度为95.79%。此外,还优化了吲哚酯的合成工艺,通过改变质子酸、路易斯碱以及反应溶剂等反应条件,减少了N-对甲苯磺酰-L-丙氨酰氯的用量,使吲哚酚和N-对甲苯磺酰-L-丙氨酰氯的反应比例为1:1,并在三氟乙酸、吡啶、无水硫酸镁和THF的存在下合成吲哚酯,得到的产率最高(71.4%),纯度为99.09%。通过工艺优化,降低了吲哚酯合成的生产成本。中间体通过LC-MS和HPLC确定其分子量和纯度,并对部分中间体和目标产物通过1HNMR和13C NMR确认其化学结构。本文还分别利用外购吡咯酯、自制吡咯酯和吲哚酯为反应底物,制作白细胞检测试纸条,并同时与西门子的白细胞检测试纸条作为对比,在准确度、灵敏度、反应时间等方面做了详细的实验和比较,最终确定吲哚酯为最佳的反应底物。
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