目的:1.基于“肝郁湿热”理论辨治绝经期复发性尿路感染的理论研究。2.评价濯淋颗粒治疗绝经期复发性尿路感染的临床疗效及安全性。3.从微生态角度,观察绝经期复发性尿路感染患者的尿液菌群和肠道菌群特征,评价濯淋颗粒对绝经期复发性尿路感染患者尿液菌群、肠道菌群的影响。方法:1.临床疗效研究:120例绝经期复发性尿路感染（recurrent urinary tract infection,rUTI）患者随机分为:治疗组、对照组,每组各60例。对照组予口服抗生素治疗2周,缓解后改成每晚小剂量抗菌治疗,继续治疗12周。治疗组给予口服濯淋颗粒,每日2次,每次200ml,服药4周后,停药2周;再服药2周,停药1周,重复3次。两组疗程均为14周。治疗结束后随访6个月,观察临床疗效,及不良反应。2.效应机制研究:16例绝经期rUTI患者随机分为中药组和西药组,每组各8例。中药组口服濯淋颗粒,每次200ml、2次/日,服用4周。西药组口服敏感抗生素治疗2周,缓解后改为每晚小剂量抗菌治疗,继续治疗2周。选择同期健康体检者8名。利用16S rDNA测序技术,检测绝经期rUTI患者及健康人群的尿液菌群和肠道菌群,观察绝经期rUTI患者的尿液菌群和肠道菌群特征,评价濯淋颗粒对绝经期rUTI患者尿液菌群、肠道菌群的影响。结果:1.临床疗效研究:①治疗14周,濯淋颗粒治疗组的总有效率为96.77%,抗生素对照组的总有效率为85%,治疗组近期临床疗效显著优于对照组（P<0.01）。治疗后6个月随访期间,对照组失访3例,治疗组失访1例。治疗组复发5例,其中痊愈复发1例,显效复发2例,有效复发2例;对照组复发28例,其中痊愈复发8例,显效复发9例,有效复发11例。治疗后6个月,治疗组完全治愈率68.33%,对照组完全治愈率20.00%,濯淋颗粒治疗组完全治愈率显著高于抗生素对照组（P<0.01）。②中医证候积分:在不同观测时间点,治疗组的中医证候积分差异有统计学意义（P<0.01）,对照组仅在治疗14周后中医证候积分差异有统计学意义（P<0.01）;在治疗14周后和治疗后6个月,治疗组中医证候积分明显低于对照组（均P<0.01）。③Kaplan-Meier曲线分析显示:无复发生存率比较,濯淋颗粒治疗组高于抗生素对照组,差异有统计学意义（P<0.01）。④治疗组不良反应发生率低于对照组,差异有统计学意义（3.33%vs 20%,P<0.01）,其中治疗组的不良反应主要为胃肠道不适（3.33%）,对照组的不良反应为胃肠道不适（10%）、肝酶升高（1.67%）、白细胞减少（8.33%）。濯淋颗粒治疗组和抗生素对照组未出现严重不良反应。2.效应机制研究:2.1尿液菌群分析（1）OTU分析显示:①rUTI患者尿液样本的OTU数目多于健康对照组,但差异无统计学意义;②与治疗前相比,中药组治疗后尿液样本OTU数目减少,西药治疗后尿液样本OTU数目增多,但差异无统计学意义。（2）PCA分析显示:①健康对照组尿液样本在PCA图中的分布相对集中,rUTI组尿液样本在PCA图中的分布相对分散,表明健康对照组各尿液样品的组成成分相似度高于rUTI组;②中药组、西药组治疗后尿液样本分布较治疗前集中,与健康对照组相似,说明经过治疗,rUTI患者的尿液菌群向健康对照组靠近。（3）α多样性分析显示:①rUTI组的尿液菌群Chao、ACE、sobs指数高于健康对照组,Shannon、Simpson指数低于健康对照组,但差异均无统计学意义;②中药组治疗后尿液菌群各α多样性指数均低于中药组治疗前,西药组治疗后各α多样性指数均高于西药组治疗前,但差异均无统计学意义。（4）β多样性分析显示:①健康人群尿液菌群在PCoA图上重叠于rUTI人群尿液菌群中。基于weightedunifrac和unweightedunifrac距离进行度量发现rUTI组与健康对照组之间的尿液菌群结构特征存在差异,差异具有统计学意义（P<0.01）。②基于unweightedunifrac和weightedunifrac PCoA分析显示,中药组、西药组rUTI患者尿液菌群在治疗后与健康对照组尿液菌群距离接近,说明rUTI患者经过治疗后尿液菌群的分布向健康对照组靠拢。（5）物种注释和分析结果显示:①在门分类水平,rUTI和健康人群尿液菌群主要构成为厚壁菌门、变形菌门、拟杆菌门和浮霉菌门。rUTI螺旋菌门丰度显著高于健康对照组（P<0.05）。中药组治疗后厚壁菌门、变形菌门、拟杆菌门丰度上升,浮霉菌门丰度下降;西药组厚壁菌门、变形菌门、浮霉菌门丰度上升,拟杆菌门丰度下降,F/B的比值下降。②在纲分类水平,rUTI组螺旋体纲丰度显著高于健康对照组（P<0.05）。中药组治疗后拟杆菌纲、梭菌纲、γ-变形菌纲比例升高,浮霉菌纲比例下降,红蝽菌纲比例上升（P<0.05）;西药组治疗后与治疗前相比梭菌纲、Bacilli比例上升,拟杆菌纲、γ-变形菌纲比例下降。③在目分类水平,rUTI组螺旋体菌目、Pasteurellales丰度显著高于健康对照组（P<0.05）。与治疗前相比,中药组治疗后拟杆菌目、梭菌目、乳杆菌目比例上升,肠杆菌目比例下降;西药组治疗后拟杆菌目、肠杆菌目比例下降,梭菌目、乳杆菌目比例上升。④在科分类水平,rUTI组和健康对照组尿液菌群以穆里巴库拉菌科、瘤胃菌科、毛螺菌科和肠杆菌科为主要优势菌科。rUTI组螺旋体菌科、Veillonellaceae、Pasteurellaceae丰度显著高于健康对照组（均P<0.05）。与治疗前比较,中药组治疗后穆里巴库拉菌科、瘤胃菌科比例上升,肠杆菌科、毛螺菌科、Prevotellaceae比例下降;西药组治疗后Muribaculaceae、肠杆菌科、Prevotellaceae比例下降,瘤胃菌科、毛螺菌科比例上升。⑤在属分类水平,健康对照组尿液菌群以克雷伯菌属、密螺旋体属2和乳杆菌属为主要优势菌属;而rUTI组尿液菌群以克雷伯菌属、密螺旋体属2和-1088-a5gutgroup为主要优势菌属。rUTI组密螺旋体属2、Ruminiclostridium6、veillonellaceaeUCG-001丰度均显著高于健康对照组（均 P<0.05）。中药组和西药组治疗后克雷伯菌属（Klebsiella）、密螺旋体属2（Treponema2）、p-1088-a5gutgroup、RuminococcaceaeUCG-010比例均下降。中药组治疗后乳杆菌属比例下降、双歧杆菌属比例上升;西药组治疗后乳杆菌属比例上升、双歧杆菌属比例下降,差异均无统计学意义。⑥在种水平上,健康对照组尿液菌群以Klebsiellavariicola、Xanthomonascampestris和Mycoplasmapulmonis为主要优势菌种,rUTI组尿液菌群以Klebsiellavariicola、Mycoplasmapulmoni 和 Weissellaparamesenteroides 为主要优势菌种。中药组治疗后 Klebsiellavariicola、Xanthomonascampestris和Mycoplasmaapulmois比例均有所下降;西药组治疗后Klebsiellavariicola、Mycoplasmapulmonis 比例有所下降,Xanthomonascampestris比例有所上升。2.2粪便菌群分析（1）OTU分析显示:①rUTI患者粪便样本的OTU数目少于健康对照组,但差异无统计学意义;②中药组治疗后患者的粪便菌群OTU数目较治疗前增多,与健康对照组共有的OTU数目略有减少;西药治疗后患者的粪便菌群OTU数目较治疗前增多,与健康对照组共有的OTU数目略有增加。（2）PCA分析显示:①健康对照组粪便菌群在PCA图中的分布相对集中,各粪便样品的组成成分相似度高于rUTI组;②中药组治疗后粪便菌群仍较为分散,西药组治疗后粪便菌群分布较治疗前集中,与健康对照组相似,说明西药组粪便菌群向健康对照组靠近。（3）α多样性分析显示:①rUTI组粪便菌群的Chao、ACE、Shannon、Simpson指数均低于健康对照组（P>0.05）,sobs指数显著低于健康对照组（P<0.05）;②中药组治疗后各α多样性指数低于中药组治疗前、西药组治疗后各α多样性指数高于西药组治疗前,差异均无统计学意义。（4）β多样性分析显示:①rUTI人群和健康人群在PCoA图上各自聚类,又有部分重叠,说明rUTI人群和健康人群的粪便菌群β多样性具有差异。基于weightedunifrac距离进行度量发现rUTI组与健康对照组之间的粪便菌群结构存在差异,具有统计学意义（P<0.01）;②中药组、西药组人群在治疗后,粪便菌群分布仍较为分散,与健康对照组距离较远。（5）物种注释和分析结果显示:①在门分类水平,健康对照组粪便菌群以厚壁菌门、拟杆菌门、疣微菌门和变形菌门为主要优势菌门,而rUTI组以拟杆菌门、厚壁菌门和变形菌门为主要优势菌门,rUTI组粪便菌群中拟杆菌门显著高于健康对照组（P<0.05）,rUTI组厚壁菌门与拟杆菌门（F/B）的比值、疣微菌门丰度显著低于健康对照组（P<0.05）。中药组治疗后拟杆菌门丰度下降,厚壁菌门、变形菌门丰度上升,疣微菌门丰度上升,F/B的比值升高;西药组治疗后拟杆菌门、疣微菌门丰度上升,厚壁菌门、变形菌门丰度下降,F/B的比值下降。②在纲分类水平,rUTI组拟杆菌纲比例显著高于健康对照组（P<0.05）。rUTI组Verrucomicrobiae、Bacilli、梭杆菌纲、Oxyphotobacteria丰度显著低于健康对照组（均P<0.05）。中药组治疗后拟杆菌纲、厌氧菌纲、Gammaproteobacteria丰度上升,梭菌纲丰度下降。西药组治疗后拟杆菌纲、梭菌纲丰度上升,厌氧菌纲丰度下降。③在目分类水平,rUTI组拟杆菌目丰度显著高于健康对照组（P<0.05）,疣微菌目、乳杆菌目、梭杆菌目丰度显著低于健康对照组（均P<0.05）。中药组治疗后拟杆菌目丰度上升、Selenomonadales、Enterobacteriales、Pasteurellales丰度上升,梭菌目下降;西药组治疗后拟杆菌目、梭菌目丰度上升,Selenomonadales、Enterobacteriales丰度下降。④在科分类水平,rUTI组和健康对照组粪便菌群以拟杆菌科、瘤胃菌科和毛螺菌科为主要优势菌科,rUTI组拟杆菌科、Streptococcaceae丰度高于健康对照组（P<0.01）,Akkermansiaceae、Rikenellaceae、FamilyⅪ丰度高于健康对照组（P<0.05）。中药组治疗后拟杆菌科、毛螺菌科丰度下降,中药组治疗后瘤胃菌科、Rikenellaceae丰度显著下降,Veillonellaceae丰度显著上升,Enterobacteriaceae丰度有所丰度上升;西药组治疗后拟杆菌科、毛螺菌科、瘤胃菌科丰度上升,Veillonellaceae、Enterobacteriaceae丰度有所下降。⑤在属分类水平,健康对照组粪便菌群以拟杆菌属、Akkermansia、Phascolarctobacterium和Dialister为主要优势菌属;而rUTI组粪便菌群以拟杆菌属和Subdoligranulum为主要优势菌属,rUTI组拟杆菌属丰度显著高于健康对照组（P<0.05）。rUTI组Akkermansia、Alistipes、Dialister和Streptococcus丰度显著低于健康对照组（均P<0.05）。rUTI组志贺菌属、双歧杆菌属丰度高于健康对照组,乳酸杆菌属丰度低于健康对照组,但差异均无统计学意义。中药组治疗后拟杆菌属丰度下降,Subdoligranulum丰度显著下降（P<0.05）;西药组治疗后RuminococcaceaeUCG-002比例显著上升（P<0.05）。中药组治疗后乳酸杆菌属、双歧杆菌属比例上升,西药组治疗后乳酸杆菌属比例下降、双歧杆菌属比例上升,但差异均无统计学意义。⑥在种分类水平,绝经期女性粪便菌群以Bacteroidesvulgatus和Phascolarctobacteriumfaecium为主要优势菌种。rUTI 组 BacteroidesstercorisATCC43183丰度显著高于健康对照组（P<0.05）。中药组治疗后Bacteroidesvulgatus 比例上升,Phascolarctobacteriumfaecium、BacteroidesstercorisATCC43183比例下降;西药组治疗后 Bacteroidesvulgatus 比 例 下 降,Phascolarctobacteriumfaecium 和BacteroidesstercorisATCC43183 比例上升。结论:1.临床疗效研究:濯淋颗粒可提高绝经期rUTI的治愈率,改善患者的临床症状,降低复发率,安全有效,并且有一定的远期疗效。2.效应机制研究:绝经期rUTI女性与健康人群的肠道菌群结构特征存在较为明显的差异。肠道菌群失衡可能是绝经期女性复发性尿路感染的发病机制之一。濯淋颗粒和抗生素治疗后,rUTI人群的尿液菌群分布较治疗前集中,向健康人群尿液菌群分布靠近。濯淋颗粒可以上调粪便厚壁菌门和疣微菌门丰度、F/B比值,可以提高rUTI人群尿液菌群、粪便菌群中双歧杆菌的比例,提高粪便菌群中乳酸杆菌比例。