γ-亚麻酸诱导肿瘤细胞凋亡以及耐药逆转机制的研究

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本论文研究了γ-亚麻酸(GLA)对四株肿瘤细胞株:大鼠嗜铬细胞瘤细胞株PC12、人慢性髓性白血病细胞K562、乳腺癌细胞株MCF-7及其阿霉素耐药株MCF-7/Adr细胞的脂质过氧化作用、细胞凋亡诱导作用。GLA作用肿瘤细胞后,能够显著抑制四株肿瘤细胞的增殖,抗氧化剂BHT能够降低肿瘤细胞受GLA的抑制作用,肿瘤细胞的MDA含量与GLA呈现量效、时效关系。运用细胞核荧光染料染色、Annexin V/PI双染(膜磷脂酰丝氨酸外翻情况检测)或者PI单染法检测了GLA处理细胞的凋亡情况;结合PC12、K562 Caspase-3活性检测结果以及Caspase抑制剂Z-VAD-fmk对凋亡的影响进行分析;结果发现:GLA能够诱导四株肿瘤细胞凋亡,凋亡形态显著,早期凋亡率达到30%以上,PI单染凋亡率达到14%,而Z-VAD-fmk能够有效抑制GLA诱导的凋亡作用。这些现象提示GLA通过激活caspase途径诱导肿瘤细胞凋亡;同时,结合MDA结果分析,GLA对细胞的作用与脂质过氧化作用有一定相关性。 另外,本文还研究了GLA对耐药细胞株MCF-7/Adr以及K562/ADM的耐药逆转效果。低浓度GLA预孵育后,MCF-7/Adr以及K562/ADM对阿霉素半抑制剂量分别降低58.33%和57.89%、胞内阿霉素积累量增加、罗丹明123胞内积累量增加、罗丹明123外排率显著降低、P-糖蛋白(P-gp)表达量降低。由此推测:GLA对耐药细胞株MCF-7/Adr以及K562/ADM的耐药逆转是通过抑制P-gp及其活性而降低化疗药物的外排率,增加细胞内药物的浓度而实现的。
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