目的:研究KLF2对类中性粒细胞S1PR1与L-selectin启动子活性的影响。方法:1、空载及KLF2质粒转染293T细胞,分别使用PCR、WB检测空白组、空载组、过表达组KLF2 m RNA与蛋白水平的表达变化;2、将KLF2质粒与S1PR1、L-selectin启动子报告质粒共转染至293T细胞中,利用双荧光素酶报告基因技术,检测KLF2对S1PR1、L-selectin启动子活性的影响;3、使用1.3%二甲基亚砜(DMSO)诱导HL-60细胞分化为类中性粒细胞(d HL-60),通过CHIP实验检测KLF2与S1PR1、L-selectin的启动子区域结合情况。结果:1、质粒瞬时转染293T细胞48小时后,通过荧光显微镜观测空载组、空白组、过表达组的荧光,并计算出转染效率为80%;通过RT-PCR、Westernblot检测KLF2 m RNA及蛋白表达量,结果显示过表达组KLF2的m RNA及蛋白表达较对照组显著增加,差异具有统计学意义(P<0.01)。实验表明成功构建KLF2质粒进行后续实验。2、将L-selectin、S1PR1启动子报告基因质粒与KLF2质粒共同或分别转染293T细胞时,发现实验组较对照组中KLF2质粒能显著提高S1PR1、L-selectin启动子活性,差异具有统计学意义(P<0.01)。3、使用1.3%DMSO诱导HL-60细胞分化为类中性粒细胞,CHIP实验结果显示,KLF2与S1PR1启动子核心区(+75bp,-44bp)及L-selectin启动子核心区(-262bp,-377bp)结合。结论:类中性粒细胞KLF2可上调L-selectin、S1PR1启动子活性,并能结合S1PR1启动子核心区(+75bp,-44bp)及L-selectin启动子核心区(-262bp,-377bp)。