【摘 要】
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目的:评价后爪皮下注射及关节腔注射A型肉毒毒素（botulinum toxin type A Bo NT/A）两种治疗方法对单碘乙酸（monoiodoacetate MIA）骨性关节炎模型大鼠的镇痛效果,并对治疗后大鼠脊髓中P2X4嘌呤受体（P2X4R）表达量进行检测,以此探讨A型肉毒毒素镇痛作用机制。方法:将75只健康雄性SD大鼠采用随机数字表法随机分成5组,其中对照组15只,造模组60只,于对
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目的:评价后爪皮下注射及关节腔注射A型肉毒毒素（botulinum toxin type A Bo NT/A）两种治疗方法对单碘乙酸（monoiodoacetate MIA）骨性关节炎模型大鼠的镇痛效果,并对治疗后大鼠脊髓中P2X4嘌呤受体（P2X4R）表达量进行检测,以此探讨A型肉毒毒素镇痛作用机制。方法:将75只健康雄性SD大鼠采用随机数字表法随机分成5组,其中对照组15只,造模组60只,于对照组大鼠左侧后肢踝关节注射50UL生理盐水,同时于造模组大鼠左侧后肢踝关节注射4mg/50u L的单碘乙酸,建立骨性关节炎模型。注射后21天将造模成功的大鼠随机分为4组:（1）后爪皮下对照组,于大鼠左侧后爪皮下注射20u L生理盐水;（2）后爪皮下给药组:于大鼠左侧后爪皮下注射5U/u L Bo NT/A;（3）关节腔对照组,于大鼠左侧后肢踝关节内注射20u L生理盐水;（4）关节腔给药组,于大鼠左侧后肢踝关节腔内注射5U/20u L的Bo NT/A。在造模前3天、造模后1、7、14、21天及给药后1、7、14、21天分别对各组相同的6只大鼠重复进行50%缩足反应阈值和下肢负重测定。采用蛋白免疫印迹（Western Blotting WB）方法在造模后21天、给药后7、14、21天对大鼠脊髓中P2X4R蛋白含量进行检测。结果:造模后大鼠的双下肢负重和50%缩足反应阈值较对照组明显降低（P<0.01）,且造模成功后的大鼠脊髓中的P2X4R蛋白水平明显升高。与后爪皮下对照组相比,后爪皮下给药组大鼠的50%缩足反应阈值及双下肢负重明显改善（P<0.05）,大鼠脊髓中的P2X4R蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。与关节腔对照组相比,关节腔给药组大鼠的50%缩足反应阈值及双下肢负重显著提高（P<0.05）,大鼠脊髓中的P2X4R蛋白水平明显降低（P<0.05）。在关节腔注射Bo NT/A后的第7天,大鼠双下肢负重显著上升,而通过皮下给药的大鼠的双下肢负重在注射后的第14天开始升高。后足皮下给药组与关节腔给药组相比,两组大鼠的50%缩足反应阈值及双下肢负重均未见明显差异（P>0.05）。结论:大鼠后爪皮下注射A型肉毒毒素可以使骨性关节炎大鼠的疼痛相关行为得到改善,与关节腔内Bo NT/A注射发挥的镇痛效果相似,但其起效时间存在差异。两种注射方式注射A型肉毒素均可通过减少大鼠脊髓中P2X4受体（P2X4R）的表达,减轻骨性关节炎的疼痛,为Bo NT/A通过中枢作用发挥镇痛作用的理论提供了新的实验依据。临床意义:为骨性关节炎的药物治疗提供新的治疗方案,缓解骨性关节炎患者的疼痛症状,完善对A型肉毒毒素镇痛作用机制的研究。
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