TEM-116和SHV-4超广谱β-内酰胺酶的表达、纯化及其药效学研究

来源 :温州医学院 温州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:CT1978
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本研究应用DNA重组技术将blaTEM-116基因克隆入pET28a质粒和pET26b质粒表达,将blaTEM-116删除信号肽序列(blaMTEM-116)克隆入pET28a质粒表达,从天然高产酶菌中获取ESBLs基因,测序证实为blaSHV-4基因,把该基因克隆入pET28a质粒和pET26b质粒表达,分析blaTEM-116基因和blaSHV-4基因序列并和其它ESBLs的序列比较,绘制分子进化树,并从产酶菌中挑选产酶量最高的pET28-TEM-116/BL21(DE3)作为工程菌,摇瓶发酵、纯化该菌产的TEM-116酶,进一步发酵罐发酵、大量纯化该酶,最后分别在牛奶中和小鼠体内验证TEM-116酶的药效学作用。
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