巩膜PPARα调控胶原合成以及近视形成的机制研究

来源 :温州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hudan913000
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目的:  近视是最常见的屈光不正,是导致视力损害的主要原因之一。但近视的发病机制尚未明确,目前缺乏有效的、从病因学上入手的防治措施。因此,近视的科学防治仍任重而道远。研究发现小鼠形觉剥夺后巩膜 PPARα及其部分下游靶基因下调;PPARα全身敲减小鼠出现明显的近视;PPARα的激动剂可抑制小鸡和豚鼠的实验性近视进展,这些发现提示 PPARα与近视之间有密切的关系。同时,PPARα全身敲减小鼠出现巩膜胶原合成减少;PPARα激动剂非诺贝特能够抑制人巩膜成纤维细胞中胶原的合成,提示 PPARα可能是通过调控巩膜的胶原合成参与近视的形成。本实验将通过研究条件性敲减巩膜 PPARα及过表达巩膜 PPARα对小鼠屈光发育及形觉剥夺性近视的影响,进一步探究巩膜 PPARα在小鼠巩膜胶原合成以及屈光发育中的调控机制。  方法:  (1)条件性敲减巩膜 PPARα对小鼠屈光发育影响:PPARα-loxP小鼠 Tenon’s囊下注射注射 AAV-Cre,以特异性敲减巩膜 PPARα。通过 EIR、OCT检测小鼠屈光、眼轴等生物学参数的改变,通过实时定量PCR检测巩膜I型胶原的变化。  (2)过表达巩膜 PPARα对小鼠形觉剥夺性近视影响:以21日龄雄性野生型(wildtype,WT)C57BL/6小鼠为实验动物。将经过屈光等参数筛选出的X只小鼠,随机分为四组:正常对照组;形觉剥夺组;右眼注射包装随机序列的腺相关病毒(AAV8-Scramble)并进行形觉剥夺组;右眼注射包装 PPARα过表达载体的腺相关病毒(AAV8- PPARα)并进行形觉剥夺组。通过 EIR、OCT检测小鼠的屈光、眼轴等生物学参数的改变,通过实时定量 PCR检测巩膜 I型胶原的变化情况。病毒注射采用Tenon’s囊下注射方法。  结果:  (1)PPARα-loxP小鼠Tenon’s囊下注射AAV-Cre可诱导小鼠出现近视。  (2)Tenon’s囊下注射包装 PPARα过表达载体的腺相关病毒可以抑制小鼠形觉剥夺性近视的形成。  结论:  敲减巩膜 PPARα可以诱导小鼠近视的形成。过表达巩膜 PPARα可以抑制小鼠形觉剥夺近视的形成。
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