本文研究了菜籽多糖对小鼠肠道内益生菌的增殖作用的影响。首先,通过碱液提取粗多糖,超滤膜去除蛋白,获得菜籽粗多糖后,将该多糖依次通过DEAE-纤维素和Sephadex G-100柱分离纯化得到两个多糖组分(RP1和RP2);然后,通过灌胃小鼠菜籽多糖,研究了该多糖对小鼠体内肠道菌群的影响;最后,以菜籽多糖为主要原料,开发一种具有保健作用的菜籽多糖益生元含片。主要研究内容及结果如下:　　菜籽多糖的提取纯化及纯度鉴定。首先,将菜籽经过粉碎、去皮后,用石油醚脱脂、95％乙醇去除单糖、低聚糖和部分色素等,收集菜籽粕放入25倍体积,4.1%NaOH溶液中,在86℃条件下提取3 h;然后,将上述浸提液先后用50 kDa超滤膜和3 kDa超滤膜过滤并收集滤液,冷冻干燥后获得菜籽粗多糖;最后,将该粗多糖通过DEAE-纤维素柱层析纯化,依次用蒸馏水和0.10 mol/L NaCl溶液洗脱,收集洗脱的组分,经过透析、浓缩和冷冻干燥后,再用Sephadex G-100层析柱进一步分离纯化,获得两个多糖组分(RP1和RP2)并进行纯度鉴定。结果表明:Molisch反应呈阳性,说明 RP1和RP2都是糖;苯酚-硫酸法法检测RP1及RP2的总糖含量分别为70.1及68.5%;碘-碘化钾反应呈阴性,说明 RP1和RP2都不含淀粉;考马斯亮蓝法测定RP1和RP2中蛋白质含量分别为12.6和17.8%;高效液相色谱图中 RP1和RP2都呈现单一对称的峰,说明两者都是单一的组分,计算得RP1及RP2的分子量分别为44.36及28.87 kDa。　　菜籽多糖对小鼠体内肠道菌群的调节作用。购入SPF级雌性昆明种小白鼠130只,适应性饲养一周后,将小鼠随机分为13组,每组10只,即空白组(灌生理盐水),低聚果糖对照组(低、中、高剂量),粗多糖组(低、中、高剂量),RP1组(低、中、高剂量)和R P2组(低、中、高剂量)。在试验前、试验第15和30天,随机抽取3只老鼠颈椎脱臼处死,并无菌采集肠道内容物,分别测量内容物的pH、挥发性盐基态氮和肠道内五种菌(双歧杆菌、乳酸菌、大肠杆菌、肠球菌、产气荚膜梭菌)的数量变化,并计算小鼠肠道B/E值和益生元指数PI的变化。结果表明:低聚果糖、粗多糖、RP1和RP2都可以降低小鼠肠道 pH和挥发性盐基态氮,对双歧杆菌和乳酸菌有明显的促进作用,但对大肠杆菌、肠球菌和产气荚膜梭菌则有明显的抑制作用;它们对小鼠肠道菌增殖效果从大到小的排列顺序为:低聚果糖>RP1>RP2>粗多糖;另外,高剂量组效果比中剂量组好,低剂量组效果最差,这说明菜籽多糖可以调节肠道菌群平衡,且在一定程度上呈现剂量与效果正相关关系。　　菜籽多糖对小鼠肠道乙酸、丙酸及乳酸的含量变化的影响。取上述试验动物的肠道内容物,一部分用无菌蒸馏水稀释10倍后,在10000 r/min条件下,离心10min,上清液经0.45μm滤膜过滤后,采用高效液相色谱(HPLC)法分析样品中的乙酸、丙酸及乳酸的含量。结果表明,灌胃低聚果糖、粗多糖、RP1和RP2都能促进小鼠肠道内乙酸、丙酸及乳酸含量的增加;低聚果糖效果最明显,RP1其次,RP2再次,粗多糖的效果最差;高剂量组效果比中剂量组好,低剂量组效果最差。　　菜籽多糖益生元含片的工艺研究。以菜籽多糖为主要原料,低聚果糖、柠檬酸、橙汁、花青素、奶粉及淀粉等为辅料,开发一种对人体有保健作用的益生元含片。首先,以感官评分为评价指标,通过单因素试验,确定了菜籽多糖、低聚果糖、柠檬酸、花青素、淀粉及奶粉的添加量。在此基础上,以感官评分为评价指标,淀粉、奶粉、低聚果糖和柠檬酸为因素,通过L9(34)正交试验,优化该含片的主要原辅料配比,其结果为:淀粉10%,奶粉20%,菜籽多糖20%,低聚果糖40%,柠檬酸1%,花青素2%及硬脂酸镁1%。然后,以含片的感官评分为评价指标,选择干燥温度、时间和加橙汁量三者作为压片工艺中的三个关键因素,通过3因素3水平正交试验,获得最佳工艺条件,即:添加橙汁6%,在60℃下干燥时间4 h。