牛泡沫病毒(Bovine Foamy Virus)属反转录病毒科泡沫病毒亚科泡沫病毒属,具有广泛的宿主范围,其在体外虽可使细胞发生强烈病变,在体内却无任何临床病症。BFV基因组在env与3’LTR之间存在若干编码调控蛋白的读码框,前期工作证明ORF-1编码病毒的反式激活因子BTas。BTas调节BFV的两类启动子-LTR和IP起始的转录,对于BFV的病毒复制至关重要。 乙酰化是体内蛋白质重要的修饰形式,作用于组蛋白的N末端或者其它蛋白的ε-赖氨酸,对转录、DNA结合能力、核定位等功能产生深远影响。本室前期工作发现,BTas蛋白与乙酰化因子p300有相互作用,二者可共定位于细胞核,推测BTas可能借助乙酰化机制行使其反式激活功能。 本文对BTas乙酰化修饰功能进行初步探讨。用去乙酰化酶抑制剂TSA处理细胞,发现BTas的激活增强,说明BTas行使功能同乙酰化相关；制备兔源抗体,确定与BTas相互作用的乙酰化因子p300可使BTas乙酰化,且p300对BTas激活BFV LTR和IP有促进作用；p300发挥乙酰转移酶活性的重要区域,HAT区缺失实验证实HAXI区是增强BTas转录激活活性的必需区；将BTas结合结构域内的12个赖氨酸逐一突变为精氨酸,瞬时转染实验初步显示BTas介导转录激活的重要位点为第36、66、74、109和110位赖氨酸,它们可能是p300乙酰化靶点；此外还发现BFV的Bet蛋白亦可被p300乙酰化。上述结果说明BTas行使自身功能需要细胞内乙酰化酶辅助,乙酰化修饰在BFV的复制、与宿主相互作用中具有重要作用。