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高血压是一种全球性的心血管疾病，常诱发多种并发症，而降压药物的长期服用会带来多种副作用，因此，寻找更加安全有效的降压药物具有重要意义。活性肽因其分子量小、溶解性好、易于穿透和吸收等特点越来越多地应用于降血压相关的药物和保健品开发。辣木富含蛋白质且具有良好的营养保健作用，其中叶片是辣木中蛋白含量和经济价值较高的部位。论文以辣木叶为原料采用碱性蛋白酶水解辣木蛋白制备ACE-肾素抑制肽，并进行分离纯化和结构鉴定，评价辣木叶ACE-肾素抑制肽的降血压活性及稳定性，可为相关食物源降血压肽的开发提供理论依据。具体研究内容及结果如下：
首先，采用蛋白酶Alcalase酶解辣木叶分离蛋白，通过膜分离技术将辣木叶蛋白水解物分离成4种不同分子量大小的组分，探讨了蛋白酶水解物及其不同膜分离组分的抗氧化及降血压活性。研究表明，低分子量辣木叶蛋白水解物具有更好的抗氧化活性和降血压活性，＜1kDa组分的ORAC值为1671.75μmolTE/mg，ACE和肾素抑制率分别为84.71%和43.72%；自发性高血压大鼠(SHRs)灌胃辣木叶蛋白水解物8h后，＜1kDa组分能够有效降低SHRs的血压(~16.80mmHg)。研究认为辣木叶蛋白Alcalase酶水解物＜1kDa组分可以作为有效的降血压添加剂应用于保健品和功能食品的开发。
其次，采用凝胶色谱层析对辣木叶蛋白水解物＜1kDa组分进行分离纯化，并对最终的活性组分进行质谱鉴定和氨基酸序列分析，获得了2个活性较高的ACE和肾素双重抑制肽Leu-Gly-Phe(LGF)和Gly-Leu-Phe-Phe(GLFF)。ACE和肾素活性分析发现，LGF的ACE(IC50，0.29 mM)和肾素抑制活性(IC50， 1.88 mM)较高，GLFF的ACE和肾素抑制活性IC50值为0.31mM和2.80mM。
最后，研究了辣木叶双重抑制肽的酶抑制动力学及其稳定性。结果发现，LGF对ACE的抑制模式是非竞争性抑制，LGFF对ACE的抑制模式可能是反竞争性抑制，LGF是肾素的竞争性抑制剂，LGFF对肾素的抑制是混合性抑制；LGF和GLFF在不同的处理温度和pH下都能保持较高的ACE和肾素抑制活性，具有很好的加工适应性；Caco-2细胞模型研究发现，LGF和GLFF能以完整形式通过细胞单层膜进入下侧，说明LGF和GLFF摄入人体可以被人体消化吸收，在功能器官或细胞上发挥作用。
本研究从辣木叶中分离出活性高且稳定的辣木叶ACE和肾素抑制肽，对降血压相关功能食品和保健品的开发具体重要意义。
首先，采用蛋白酶Alcalase酶解辣木叶分离蛋白，通过膜分离技术将辣木叶蛋白水解物分离成4种不同分子量大小的组分，探讨了蛋白酶水解物及其不同膜分离组分的抗氧化及降血压活性。研究表明，低分子量辣木叶蛋白水解物具有更好的抗氧化活性和降血压活性，＜1kDa组分的ORAC值为1671.75μmolTE/mg，ACE和肾素抑制率分别为84.71%和43.72%；自发性高血压大鼠(SHRs)灌胃辣木叶蛋白水解物8h后，＜1kDa组分能够有效降低SHRs的血压(~16.80mmHg)。研究认为辣木叶蛋白Alcalase酶水解物＜1kDa组分可以作为有效的降血压添加剂应用于保健品和功能食品的开发。
其次，采用凝胶色谱层析对辣木叶蛋白水解物＜1kDa组分进行分离纯化，并对最终的活性组分进行质谱鉴定和氨基酸序列分析，获得了2个活性较高的ACE和肾素双重抑制肽Leu-Gly-Phe(LGF)和Gly-Leu-Phe-Phe(GLFF)。ACE和肾素活性分析发现，LGF的ACE(IC50，0.29 mM)和肾素抑制活性(IC50， 1.88 mM)较高，GLFF的ACE和肾素抑制活性IC50值为0.31mM和2.80mM。
最后，研究了辣木叶双重抑制肽的酶抑制动力学及其稳定性。结果发现，LGF对ACE的抑制模式是非竞争性抑制，LGFF对ACE的抑制模式可能是反竞争性抑制，LGF是肾素的竞争性抑制剂，LGFF对肾素的抑制是混合性抑制；LGF和GLFF在不同的处理温度和pH下都能保持较高的ACE和肾素抑制活性，具有很好的加工适应性；Caco-2细胞模型研究发现，LGF和GLFF能以完整形式通过细胞单层膜进入下侧，说明LGF和GLFF摄入人体可以被人体消化吸收，在功能器官或细胞上发挥作用。
本研究从辣木叶中分离出活性高且稳定的辣木叶ACE和肾素抑制肽，对降血压相关功能食品和保健品的开发具体重要意义。