论文部分内容阅读
第一部分FBXO32在口腔鳞癌组织中的表达及意义目的:研究FBXO32在口腔鳞癌组织中的表达,分析其与临床病理参数之间的关系,探讨FBXO32在口腔鳞癌进展中的作用。方法:通过应用qRT-PCR技术检测口腔鳞癌组织及对应癌旁正常黏膜中FBXO32基因的表达情况,应用配对t检验、卡方检验和连续校正卡方检验进行统计学分析,结果以P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.在43例口腔鳞癌组织中,FBXO32 mRNA的相对表达量为(0.62±0.38),癌旁正常黏膜组织中的相对表达量为(1.67±0.85),两者之间具有统计学差异(P<0.05)。2.FBXO32 mRNA的表达与口腔鳞癌患者年龄、性别无关(P>0.05),与TNM分期、淋巴结转移、分化程度有关,其中Ⅲ+Ⅲ期FBXO32 mRNA表达量低于Ⅰ+Ⅰ期(P<0.05),低分化组FBXO32 mRNA表达量低于高分化组(P<0.05),有淋巴结转移组FBXO32 mRNA表达量低于无淋巴结转移组(P<0.05),差异均有统计学意义。结论:FBXO32在口腔鳞状细胞癌中发挥抑癌基因的作用,其表达与肿瘤的进展相关,可以作为评估口腔鳞癌患者预后的重要指标。第二部分过表达FBXO32对口腔鳞癌细胞生物学行为的影响目的:检测口腔鳞癌细胞株Tca83、Cal27中FBXO32的表达,研究过表达FBXO32对口腔鳞癌细胞Tca83增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法:1.应用qRT-PCR技术检测口腔鳞癌细胞株Tca83、Cal27及mycFBXO32质粒转染Tca83中FBXO32 mRNA表达。2.Western blot技术验证Tca83细胞转染外源FBXO32后的蛋白表达。3.CCK8增殖实验检测过表达FBXO32对Tca83细胞增殖能力的影响。4.划痕愈合实验检测过表达FBXO32对Tca83细胞迁移能力的影响。5.Transwell小室实验检测过表达FBXO32对Tca83细胞侵袭能力的影响。结果:1.Tca83、Cal27细胞株中FBXO32 mRNA相对表达量分别为(1.01±0.20)、(10.64±0.47),Tca83细胞株中FBXO32 mRNA相对表达量低于Cal27中的表达。myc-FBXO32质粒转染Tca83细胞株中FBXO32mRNA表达明显高于空白组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05;P<0.05)。2.myc-FBXO32质粒转染Tca83细胞株后,FBXO32外源性蛋白稳定表达。3.过表达FBXO32后Tca83的增殖速度低于与空白组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.05)。4.过表达FBX032后Tca83细胞水平迁移速度距离为(2.34±0.55)明显低于空白组(5.09±0.52)和对照组(4.99±0.45),差异有统计学意义(P<0.05,P<0.05)。5.过表达FBXO32后Tca83细胞纵向迁移细胞数为(53.7±13.5)明显少于空白组(173.0±15.0)和对照组(179.7±6.7),差异有统计学意义(P<0.05;P<0.05)。过表达FBXO32后细胞通过人工基底膜(Matrigel)的细胞数为(25.0±4.6)明显少于空白组(111.0±5.6)和对照组细胞数(116.7±7.6),差异有统计学意义(P<0.05;P<0.05)。结论:过表达FBXO32基因后,Tca83细胞增殖、迁移和侵袭能力均显著降低,表明FBXO32可能参与口腔鳞癌细胞的增殖、迁移、侵袭等肿瘤恶性行为,可作为口腔鳞癌基因治疗的潜在靶点。