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研究背景结肠癌(colorectal cancer, CRC)是一种常见的消化道恶性肿瘤,其发病率和死亡率呈逐年上升趋势。小分子核糖核酸(microRNA, miRNA, miR)是一类内源性的非编码单链RNA分子,近年来研究表明结肠癌组织中不同microRNA的表达水平不同,microRNA与结肠癌的发生、发展、预后及复发都有着紧密联系。目前miR-143、miR-145、miR-21等在结肠癌中研究较多,而miR-499-5p在结肠腺瘤、结肠癌中的表达情况及其与结肠癌变发生发展的关系未见报道。研究目的本课题主要研究结肠癌、结肠腺瘤以及正常结肠组织中的miR-499-5p的表达水平,并分析其与临床分期、分化程度、淋巴结转移等临床病理特征的关系,探讨其与结肠腺瘤以及结肠癌发生、发展的关系,揭示miR-499-5p在结肠腺瘤和结肠癌中的可能作用,为miR-499-5p在结肠癌中的研究提供理论基础。研究方法收集扬州大学医学院临床医院江苏省苏北人民医院病理科2013年1月至2014年1月期间的石蜡包埋结肠癌组织、结肠腺瘤及正常结肠组织标本各40例,以结肠癌组织和结肠腺瘤组织作为实验组,正常结肠组织标本作为对照组。并收集患者个人信息及临床资料。分别提取40例结肠癌组织、结肠腺瘤组织和正常结肠组织标本的总RNA,采用逆转录实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测miR-499-5p的表达量,选择U6作为内参。计量资料以均数±标准差(x±SD)表示,组间均数比较采用独立样本t检验,多个样本均数比较采用单因素方差分析。计数资料采用χ2检验。检验水准a=0.05。P<0.05差异有统计学意义。研究结果1.qRT-PCR结果显示：miR-499-5p在结肠癌组、结肠腺瘤组与正常对照组中的表达量分别为12.15±5.83、3.63±0.93、1.00±0.04,三者比较有统计学差异(F=80.143,P<0.05)。两两比较,miR-499-5p在结肠腺瘤组织的表达较正常结肠组织升高,有统计学差异(P<0.05),miR-499-5p在结肠癌组织的表达较结肠腺瘤组织、正常结肠组织升高,有统计学差异(P<0.05)。2.结肠腺瘤组织中miR-499-5p的表达与患者性别、年龄、组织病理分型无关,无统计学差异(P>0.05)。结肠腺瘤组织中miR-499-5p的表达水平与腺瘤直径有关,其在直径(d<lcm)组、直径(1≤d<2cm)组、直径(d≥2cm)组中的表达量分别为3.27±2.29、3.44±2.28、3.29±2.05,三者有统计学差异(F=5.696,P<0.05)；两两比较,发现直径(1≤d<2cm)组和直径(d≥2cm)组与直径(d<1cm)组比较均有统计学差异(P<0.05)。3.结肠癌组织中miR-499-5p的表达与患者性别、年龄、肿瘤直径、远处转移无关,无统计学差异(P>0.05)。结肠癌组织中miR-499-5p的表达与肿瘤的分化程度相关,其在高分化组、中分化组、低分化组中表达量分别为9.22±2.10、11.24±4.06、21.33±3.89,三者比较有统计学差异(F=26.300,P<0.05)。高分化组中表达量低于中分化组、低分化组的表达量,有统计学差异(P<0.05),中分化组表达量低于低分化组的表达量,有统计学差异(P<0.05)。结肠癌组织中miR-499-5p的表达水平与临床TNM分期有关,其在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、ⅣV期中的表达量分别为8.36±1.30、11.21±4.78、15.80±5.78和16.83±6.92,有统计学差异(F=3.954,P<0.05)。结肠癌组织中miR-499-5p的表达水平与浸润深度有关,其在T1+T2、T3+T4的结肠癌组织中表达量9.10±1.73、14.46±6.05,有统计学差异(t=4.439,P<0.05)。结肠癌组织中miR-499-5p的表达与淋巴结转移情况有关,其在伴有淋巴结转移和无远处转移的结肠癌组织中表达量分别为15.87±6.12、11.11±4.06,有统计学差异(t=-2.783,P<0.05)。结论1. miR-499-5p的表达水平在正常结肠、结肠腺瘤、结肠癌组织中呈逐渐增高的趋势,说明其在结肠癌的癌变过程中呈动态变化。2. miR-499-5p可能参与了结肠细胞的早期瘤变,并与腺瘤直径的大小呈现相关性,但是在腺瘤的恶性分化过程中作用较小。3. miR-499-5P可能作为原癌基因,参与着结肠癌的发生发展,同时与肿瘤的转移及浸润存在密切相关性,可见miR-499-5p有望能作为评估肿瘤生物学行为和判断预后的指标。