鳞柄小奥德蘑(Oudemansiella furfuracea),又名长根小奥德蘑鳞柄变种(O.radicata var.furfurace)或鳞腿长根金钱菌(Colllybia radicata var.furfuracea),隶属于伞菌目白蘑科奥德蘑属,俗称露水鸡枞。在我国西南分布广泛,目前已初步实现人工栽培。目前对奥德蘑属的研究主要侧重于长根菇,本文从理化性质入手探讨鳞柄小奥德蘑多糖的药理作用。运用响应面法筛选多糖最佳提取工艺后,确认其微量元素及氨基酸含量等基本营养成分的前提下,分析其单糖组成及分子量分布范围。研究了鳞柄小奥德蘑在免疫调节、抗炎及保护肝脏方面的作用,为日后鳞柄小奥德蘑的开发应用及推广提供依据。1.以水提醇沉法对多糖进行提取,设置单因素实验,以响应面法优化提取工艺以获得鳞柄小奥德蘑多糖(Oudemansiella furfuracea polysaccharide,OFP)的最佳提取条件。结果显示多糖最佳提取工艺为:提取时间3h,提取温度80℃,提取液料比为35:1,此优化条件下多糖提取率和糖含量分别为8.72%及28.30%,几乎不含糖醛酸,蛋白质含量为9.40%。2.采用Shimadzu HPLC系统,Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱,流动相为PBS,流速为1.0ML/min,进样量为10μL,检测波长为245nm。对鳞柄小奥德蘑多糖进行了完全酸水解,与标准品比较,结果表明OFP中含有大量Glc,并含有一定量的Gal和Man,含有少量Fuc、GlcA和Xyl。以高效凝胶色谱法,采用LC-10Avp高效液相色谱仪系统测得其分子量主要分布在616KD,13KD及2KD三个级分。3.鳞柄小奥德蘑多糖中氨基酸的含量测试结果显示,供试多糖中总氨基酸的含量为1.87g/100g,共测得18种氨基酸,其中包括THR、TYR、PHE等8大人体必须氨基酸及其他多种氨基酸。在测量各微量元素含量的实验中,结果显示,鳞柄小奥德蘑多糖中含有多重微量元素,其中包含铜、锌、铁3种人体必需微量元素及其他各种微量元素。4.鳞柄小奥德蘑多糖对正常小鼠的免疫调节研究。参照Muller提出的近似LD50法对多糖进行急性毒性试验,观察小鼠体重及脏器指数变化,对小鼠血清中细胞因子含量进行测定,流式细胞仪测定多糖对小鼠T淋巴细胞亚群的影响,检测多糖对小鼠的脾淋巴细胞增殖作用。结果显示,鳞柄小奥德蘑多糖的LD50>5g/kg,符合国家标准,可用于进一步实验。多糖各剂量组均能提高正常小鼠胸腺指数和脾脏指数,其中高剂量组对胸腺指数的提高表现为极其显著(P<0.01)其余各组对脏器指数虽有提高,但并无统计学意义。与空白对照组比较,多糖高、中剂量组可显著提高小鼠血清中IL-2含量(P<0.01),高中低剂量组均可显著提高血清中IL-4含量(P<0.01),多糖各剂量组均可显著提高小鼠血清中TNF-α与IFN-γ含量(P<0.01)。多糖在脾淋巴细胞亚群中高、中剂量组可显著提升CD4+含量(P<0.01),多糖高剂量组可显著减少CD8+含量(P<0.01)。多糖高、中剂量组可显著提高CD4+/CD8+比值(P<0.01)。同时,各剂量组均可促进小鼠脾淋巴细胞的增殖作用,且促进作用与剂量成正相关,其中最高剂量组(1000mg/kg)尤为显著(P<0.01)。5.鳞柄小奥德蘑多糖对环磷酰胺所致免疫抑制小鼠的免疫增强研究。测定小鼠脏器指数的变化,血清中细胞因子的含量变化,小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能及免疫抑制小鼠的红细胞数与白细胞数。结果显示,与模型组相比,多糖各剂量组均能显著提高小鼠胸腺及脾脏指数,其中以中剂量组最为显著(P<0.05),其余各组虽有提高,但无统计学意义。与模型组比较,多糖高、中、低剂量组均可提高因免疫抑制而降低的IL-2、IL-4、TNF-α、IFN-γ含量,其中,多糖高剂量组及中剂量组对IL-2、IL-4、TNF-α、IFN-γ的恢复水平均有极显著差异(P<0.01)。与模型组相比,多糖各剂量组均能提高免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,其中,高剂量组表现的尤为显著(P<0.01)。与模型组比较,多糖高、中剂量组可显著提高小鼠机体中的白细胞数(P<0.01),多糖中剂量组可显著提高其红细胞数(P<0.05)。6.鳞柄小奥德蘑多糖对酒精所致小鼠急性肝损伤的实验中,以空白组、模型组、阳性组、多糖高、中、低剂量各组分别灌喂相应溶液3h后,除空白组灌喂生理盐水外,其余各组灌喂56°北京二锅头,以连续造模14天的方式进行研究。结果显示鳞柄小奥德蘑多糖高、中剂量组能显著缓解小鼠因肝损伤所造成的肝肿大,降低其胸腺指数及脾脏指数。其中,高剂量组作用尤为显著(P<0.01)。多糖可降低血清中ALT、AST活性,升高AST/ALT比值,以高剂量组对ALT的降低作用尤为显著(P<0.01)。多糖可提高肝组织中SOD、GSH-Px活性,降低MDA含量,以中、高剂量组对SOD、GSH-Px活性的升高最为显著(P<0.01),同时显微镜下观察组织切片可见显著病理改善。7.鳞柄小奥德蘑多糖的抗炎作用,采用小鼠耳肿胀的方式对多糖抗炎效果进行研究。结果显示,与空白对照组比较,鳞柄小奥德蘑多糖高剂量组对小鼠的耳肿胀程度有明显的降低作用(P<0.05),各剂量组小鼠的脾脏指数及胸腺指数均有所提高,其中高、中剂量组呈现极显著提高作用(P<0.01)。