扶正抗癌汤含药血清联合顺铂对人卵巢癌HO-8910细胞凋亡的机制研究

来源 :辽宁中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liunian2008
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:从细胞水平探索中药复方扶正抗癌汤联合顺铂对卵巢癌HO-8910细胞凋亡的影响及作用机制。为扶正抗癌汤联合顺铂治疗卵巢癌提供实验依据。材料与方法:1.观察不同浓度扶正抗癌汤含药血清对人卵巢癌HO-8910细胞增殖的影响扶正抗癌汤含药血清的制备:将SPF级SD大鼠(雄性)20只随机分为两组,每组10只,适应性喂养一周后开始灌胃,将购买的扶正抗癌汤浓缩6倍后,按人等效剂量的9倍予以灌胃,选择一组大鼠每只灌胃4.05ml浓缩后的扶正抗癌汤,连续灌胃10天,并标记为含药血清组;剩下的一组大鼠每只灌胃4.05ml生理盐水,连续灌胃10天,并标记为空白血清组。灌胃第十天时,于给药后1h,水合氯醛腹腔注射,麻醉后取血,分别制备含药血清与空白血清冷藏以备用。将人卵巢癌HO-8910细胞接种于96孔板,再将扶正抗癌汤含药血清与空白血清按照1:0、1:1、1:3的比例进行配比,依次标记为高浓度组、中浓度组、低浓度组后分别干预人卵巢癌HO-8910细胞24h,并用MTT(3(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐)法进行检测,观察不同浓度扶正抗癌汤含药血清对人卵巢癌HO-8910细胞增殖的影响。2.观察扶正抗癌汤含药血清联合顺铂对人卵巢癌HO-8910细胞的影响将人卵巢癌HO-8910细胞随机分为空白对照组、扶正抗癌汤含药血清联合顺铂组和顺铂组,并根据MTT结果显示,选取扶正抗癌汤含药血清最适浓度联合顺铂和顺铂分别干预人卵巢癌HO-8910细胞。分别用CCK8法检测各组细胞增殖情况;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;免疫细胞化学法检测各组细胞FAS(凋亡蛋白-1)、FAS-L(FAS配体)表达情况;Western-blot法检测各组细胞Caspase-3(半胱氨酸蛋白酶-3)、Caspase-8(半胱氨酸蛋白酶-8)蛋白表达情况。结果:1.不同浓度扶正抗癌汤含药血清对人卵巢癌HO-8910细胞增殖的影响从MTT结果可以看出,扶正抗癌汤含药血清对人卵巢癌HO-8910细胞的增殖具有抑制作用,且高浓度扶正抗癌汤含药血清干预人卵巢癌HO-8910细胞时抑制作用最佳(p<0.01)。2.扶正抗癌汤含药血清联合顺铂对人卵巢癌HO-8910细胞的影响CCK8检测结果显示,与空白对照组相比,各组细胞OD值(光密度值)均明显降低,差异具有统计学意义(p<0.01),且扶正抗癌汤联合顺铂组与顺铂组细胞的OD值相比,差异同样具有统计学意义(p<0.01);流式细胞术结果显示,与空白对照组相比,各组细胞凋亡率均有上升,差异具有统计学意义(p<0.01),扶正抗癌汤联合顺铂组与顺铂组细胞的凋亡率相比,差异也具有统计学意义(p<0.01);免疫细胞化学法结果显示,与空白对照组相比,各组细胞FAS、FAS-L的表达均有上升,差异具有统计学意义(p<0.01),扶正抗癌汤联合顺铂组与顺铂组细胞的FAS、FAS-L表达之间也具有统计学差异(p<0.01);Western-blot法结果显示,与空白对照组相比,各组细胞Caspase-3、Caspase-8的蛋白表达水平均有上升,差异具有统计学意义(p<0.01),扶正抗癌汤联合顺铂组与顺铂组细胞的Caspase-3、Caspase-8蛋白表达水平,不具有统计学差异(p>0.05),但是扶正抗癌汤联合顺铂组的Caspase-3、Caspase-8蛋白表达水平要高于顺铂单药组。结论:1.高浓度扶正抗癌汤含药血清对人卵巢癌HO-8910细胞的增殖抑制作用最佳。2.扶正抗癌汤含药血清联合顺铂可以抑制人卵巢癌HO-8910细胞的增殖,并增加HO-8910细胞的凋亡。3.扶正抗癌汤含药血清联合顺铂通过上调HO-8910细胞中FAS、FAS-L的蛋白表达水平,使FAS/FAS-L通路活化,进一步使Caspase-3、Caspase-8激活,从而促进HO-8910细胞的凋亡。
其他文献
目的:本文利用贯穿糖尿病心肌病始终的瘀证作为切入点,应用中药提取物姜黄素对糖尿病心肌病的干预作用进行相关的实验研究,探究姜黄素的效果以及作用机制,为治疗糖尿病心肌病提供新的思路与方法。材料与方法:本实验中用高糖培养H9c2细胞通过棕榈酸诱导,模拟糖尿病心肌病内环境,分别用五种不同的处理方式进行干预,观察不同处理方式对细胞影响以及他们之间的差别。五组分别为:正常培养的细胞为空白组(Con),加棕榈酸
学位
目的:用高脂饲料喂养Apo E基因敲除(Apo E-/-)小鼠建立动脉粥样硬化(AS)模型,观察搜风祛痰中药对Apo E-/-小鼠血清中血脂的影响;从自噬小体和线粒体自噬PINK1/Parkin信号通路的角度,探讨搜风祛痰中药对自噬和线粒体自噬的影响,进一步阐明搜风祛痰中药对治疗AS的作用机制,丰富“风痰”理论科学内涵,同时也为以后临床更广泛的应用搜风祛痰中药提供有力的科学支撑。材料与方法:SPF
学位
目的:运用网络药理学的方法,筛选补肾活血复方治疗慢性心力衰竭大鼠的有效成分及关键靶点等,并通过建立慢性心力衰竭大鼠模型,从组织学及分子水平上研究补肾活血复方对慢性心力衰竭大鼠的IL-6及STAT3蛋白的影响,为后续补肾活血复方改善慢性心力衰竭提供新的诊疗思路和方法。材料与方法:1基于网络药理学和分子对接探讨补肾活血复方治疗慢性心力衰竭的作用机制。运用TCMSP检索补肾活血复方的有效成分及作用靶点,
学位
目的:观察甘姜苓术汤对兔膝骨关节炎(Knee Osteoarthritis,KOA)模型关节液中转化生长因子-β1(TGF-β1)和基质金属蛋白酶-3(MMP-3)表达水平的影响。进一步加深对膝骨关节炎病程变化的认识,探讨甘姜苓术汤发挥药理学作用的机理,为临床治疗KOA提供新的解决方案。材料与方法:选用日本大耳白兔28只随机分成空白组、模型组、双氯芬酸钠组和甘姜苓术汤组四组。每组7只,空白组不做处
学位
目的:本研究旨在基于“从脾论治”冠心病理论基础探讨健脾祛痰化瘀方干预脾虚痰浊AS大鼠模型的效应机制,为治疗AS提供理论和实验依据。材料与方法:20只SPF级SD雄性大鼠,经适应性喂养发现大鼠无异常后对其进行造模,除空白组给予正常鼠料饲养外,其它四组给予高脂饲料建立脾虚痰浊AS大鼠模型21周。在饲喂两种不同饲料的同时,对大鼠进行随机分组并给予不同剂量的干预药物进行灌胃治疗,A组给予健脾祛痰化瘀方低剂
学位
目的:以高脂饮食诱导的代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)大鼠模型作为研究对象,探究疏肝化滞胶囊防治MAFLD可能的作用机制,以期为疏肝化滞胶囊治疗MAFLD提供一定的科学依据。材料与方法:1.30只SPF级雄性SD大鼠采用随机数字表法随机分为正常对照组、模型组和疏肝化滞胶囊组,每组10只。正常对照组给予普通饲料喂养;模型组、疏肝化滞胶囊组给予高脂饲料(含0.15%胆固醇的“西方饮食”高脂纯化饲料饲料
学位
目的:研究斑蝥酸钠维生素B6联合优替德隆对人乳腺癌MDA-MB-231细胞株增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响,运用网络药理学和分子对接研究等方法分析斑蝥治疗乳腺癌的潜在作用机制。方法:1.运用CCK-8法检测斑蝥酸钠维生素B6、优替德隆对人乳腺癌MDA-MB-231细胞株增殖的影响,并分别计算出IC50值。选取适当的斑蝥酸钠维生素B6浓度与优替德隆联合,检测联合组抑制率。用流式细胞术检测斑蝥酸钠维生
学位
报纸
<正>案卷是案件的载体和表现形式,阅卷是检察官审查案件的主要方式和基本作业,磨练阅卷方法、提高阅卷能力,形成科学的思维方式和熟练的工作方法,对于正确、高效、妥善办理案件,具有十分重要的作用。笔者结合工作实践,对检察官阅卷中的思维方式和工作方法谈一点体会和思考。一、对阅卷活动重要性的认识还有待提高司法活动在本质上是对案件的认识和判断活动,但不同机关司法活动又各具特点。
期刊
目的:肝硬化是多种原因导致慢性肝损害的终末阶段,严重威胁人类身体健康。舌诊作为中医望诊的一部分,在肝硬化诊治中起到至关重要的作用。肝硬化患者紫暗舌是血瘀证的指征之一,可能提示了肝硬化患者的高凝状态。目前尚缺乏探讨舌象与实验室检查,尤其是止血实验检查相关性的研究。我们研究目的包括:探究肝硬化患者舌象特征与实验室指标及血栓弹力图(Thromboelastography,TEG)的关系,为中医舌诊判断肝
学位