禽呼肠孤病毒（Avianreovirus,ARV）感染能引起鸡病毒性关节炎、腱鞘炎、慢性呼吸系统疾病,并引起鸡的免疫抑制、生长发育不良。近年来,在我国江苏、山东和福建等地的养殖场中频频发现禽呼肠孤病毒感染,并造成巨大的经济损失。细胞未折叠蛋白反应（Unfolded protein response,UPR）是细胞为维持内质网稳态而启动的一系列补偿调节机制,包含三条经典途径,分别为ATF6、PERK和IRE1途径。UPR信号通路被激活后能促进未折叠蛋白的折叠和错误折叠蛋白的降解,并增强细胞在内质网应激状态时的分泌能力,以恢复内质网稳态,促进细胞存活或调控细胞凋亡。UPR在调节内质网稳态中具有重要作用,并且与病毒合成息息相关。不同病毒感染激活的UPR途径不尽相同,目前已有关于禽呼肠孤病毒激活细胞UPR PERK通路和IRE1通路的报道,但其激活ATF6通路的分子机制暂不清楚。本研究以vero细胞为对象,研究禽呼肠孤病毒诱导细胞细胞未折叠蛋白反应的分子机制以及其与病毒复制、细胞凋亡间的相互关系。实验结果如下:1.ARV感染vero细胞激活细胞UPR的三条途径。通过qRT-PCR和Western blot方法分别检测ARV感染不同时间点细胞中UPR三条途径中关键因子的转录和翻译表达水平。结果显示,GRP78,ATF6,CHOP表达明显上调且XBP1发生剪接效应,说明ARV感染激活细胞UPR所有途径。2.UPR能促进ARV增殖。σC蛋白是ARV合成病毒粒子的重要组成部分,可作为病毒增殖的检测基因。使用UPR诱导剂衣霉素激活细胞UPR,使用内质网应激抑制剂4-PBA和利用shRNA介导敲低ATF6表达,接种ARV病毒后,通过qRT-PCR方法检测ARV的复制水平。结果表明抑制细胞内UPR可抑制ARV的复制水平。3.ARV可通过诱导UPR引发宿主细胞凋亡。收取vero细胞感染ARV不同时间点样品,通过Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术和Western blot方法分别检测细胞凋亡率和Caspase-12、cleaved-Caspase-3的蛋白水平变化。结果表明细胞凋亡率与ARV复制水平呈一定正相关关系。使用内质网应激抑制剂4-PBA和shRNA介导敲低ATF6表达,感染ARV的vero细胞的凋亡率显著下降,说明UPR及其ATF6途径在ARV诱导细胞凋亡中发挥重要作用。综上所述:ARV感染能激活细胞UPR信号通路。抑制UPR及其ATF6途径能抑制ARV的增殖及ARV诱导的细胞凋亡。