小麦SPL家族TaSPL17基因调控穗发育的功能研究

来源 :哈尔滨师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:willzhang86
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小麦是我国重要的粮食农作物,小麦产业的发展与粮食安全和社会稳定息息相关,所以提高小麦的产量成为育种工作者的重要目标。TaSPL17基因在穗发育的调控过程中扮演重要角色,且基因编辑是对基因组进行定向修饰的一项新技术。所以本研究利用CRISPR技术构建了TaSPL17基因的敲除载体并结合其他分子生物学技术对该基因在小麦生长发育过程中的功能做进一步研究,分析TaSPL17基因对培育高产优质小麦品系的重要意义。主要研究结果如下:1.小麦TaSPL17基因编辑载体的构建与转化将TaSPL17基因构建到pBUE411编辑载体中,并命名为pBUE411-TaSPL17。通过农杆菌介导小麦幼胚愈伤法将TaSPL17基因转化至小麦受体Fielder中,对筛选出的植株进行PCR检测和突变类型鉴定,获得了TaSPL17 abd纯合三突变体,ab、ad、bd基因组纯合双突变体以及a、b、d单突变体纯合植株。2.TaSPL17突变体植株的功能鉴定对不同编辑方式的的突变体植株以及Fielder植株进行表型鉴定及农艺性状分析以及TaSPL17A、TaSPL17B和TaSPL17D蛋白的亚细胞定位情况和TaSPL17基因在穗发育过程中的表达情况。结果表明,TaSPL17abd三突变体植株表现出穗长严重缩短,穗粒数变少,茎秆变细,分蘖有所增加等表型。在影响穗发育方面,ad双突变体植株较ab,bd的表型更加明显,a,d单突变体植株较b表型更加明显,表明TaSPL17B可能是个弱等位基因。细胞学观察表明,TaSPL17可能通过影响细胞数目来决定器官大小。亚细胞定位结果表明TaSPL17A、TaSPL17B和TaSPL17D蛋白均定位在细胞核上,无明显差异。表达分析结果表明TaSPL17B在穗部的相对表达量较低,TaSPL17A,TaSPL17D在穗部相对表达量较高。结果表明三个TaSPL17等位基因功能差异可能是由于表达水平的差异引起的。
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