【摘 要】
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目的：研究铜诱导人肝细胞L-02的损伤作用及其可能的作用机制，为预防和治疗铜过载引起的疾病提供实验依据和理论基础。 方法：以不同浓度的硫酸铜(0、50、100、150、200μmol／L)
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目的：研究铜诱导人肝细胞L-02的损伤作用及其可能的作用机制，为预防和治疗铜过载引起的疾病提供实验依据和理论基础。 方法：以不同浓度的硫酸铜(0、50、100、150、200μmol／L)与L-02细胞共培养18小时作量效分析；以150μmol／L硫酸铜与L-02细胞共培养(0、6、12、18、24小时)作时效分析。MTT法检测细胞活力和线粒体整体功能。黄嘌呤氧化酶法检测细胞培养上清液中超氧化物歧化酶(SOD)活性。比色法测定还原型谷胱甘肽(GSH)含量。硫代巴比妥酸法(TBA)检测氧化产物丙二醛(MDA)含量。透射电镜观察线粒体超微结构的变化。罗丹明123(Rh123)和碘化丙啶(PI)结合流式细胞仪(FCM)检测线粒体膜电位(MMP)的变化和细胞凋亡率。免疫细胞化学法检测细胞色素C(Cyt C)的释放。实验数据以均数加减标准差((?)±S)表示，结果用SPSS13.0软件进行统计分析。 结果： 1．MTT结果显示：铜呈剂量依赖性和时间依赖性的抑制细胞生长活力和破坏线粒体整体功能(p＜0.05，p＜0.01)。 2．实验观察了铜对L-02细胞SOD活力和GSH、MDA含量的影响，发现铜能抑制细胞培养上清液中抗氧化酶SOD活性，降低GSH含量，使氧化产物MDA生成增加(p＜0.05，p＜0.01)。 3．透射电镜下观察到线粒体结构受到不同程度的损伤，并随剂量增大和时间延长损伤加重。线粒体肿胀明显，轮廓不清楚；膜模糊不清，部分膜破裂；线粒体嵴明
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