油桐悬浮细胞系的建立及FLC同源基因的分离克隆

来源 :中南林业科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangfei871010
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
油桐是我国特有经济林木,栽培历史悠久,品种多,分布广。以其种子为原料榨制而成的桐油是重要的工业用油,经济价值高。同时,油桐(三年桐)具有独特的生物学特性,具有成为经济林模式植物的潜力。本文以具有独特早花性状的对年桐为研究对象,通过愈伤组织诱导途径,初步建立了悬浮细胞体系,为进一步的油桐细胞生物学研究和细胞遗传操作提供了良好的实验系统和理论依据。同时进行了油桐成花抑制基因FLC同源基因分离克隆的研究,是建立油桐成花基因调控机理实验体系的一部分,可以从分子水平上为研究油桐成花机理提供一条新途径。本论文主要研究结果如下:1、以油桐叶片为材料进行愈伤组织的诱导试验。通过比较不同外植体、培养基以及生长调节剂的种类和用量的愈伤组织诱导效果,筛选出植物生长调节剂最佳组合及配比,结果表明,2/3 MS+KT 0.5(mg/L)+2,4-D 0.3(mg/L)为最佳培养基配方,可以快速诱导出疏松程度较好、脱分化程度较高的愈伤组织,为下一步建立悬浮细胞系奠定了基础。2、以愈伤组织,建立了油桐起始悬浮细胞系。通过观察细胞不同起始浓度对油桐悬浮细胞生长状况的影响,发现浓度过低,细胞生长速率降低,分化能力较弱,细胞很难增殖;浓度过高,则生长周期缩短,后期细胞生活率低。从保持油桐悬浮细胞系稳定性的角度看,适宜的起始接种浓度为1.5×104-1.0×105个/mL。3、观测了油桐悬浮细胞系的生长规律。以细胞生长量(鲜重)为指标,绘制了油桐悬浮细胞的生长曲线,建立了理论生长模型。结果表明,油桐悬浮细胞系的生长动态可分为延迟期、对数生长期、减慢生长期以及衰亡期,基本呈“s”形曲线。4、初步建立了油桐悬浮细胞系继代培养条件:2/3 MS液体培养基,2,4-D 0.3 mg/L,KT 0.5 mg/L,3%蔗糖,pH 5.8,于25℃散射光或黑暗的培养室,回旋式振荡培养,转速为110 rpm,悬浮培养初期每隔9d继代换液1次。27 d后,转人新鲜培养基中,每隔6d继代换液1次。5、以对年桐为材料,对提取的基因组总DNA及花芽总RNA,分别设计引物,以期利用PCR扩增出油桐FLC基因的部分片段。但是测序结果经网上Blast比对相似度太低,不能证明是FLC基因的部分序列。
其他文献
本文以浙江种源马尾松1139×广西种源马尾松5916的F1杂交群体为作图群体,主要利用SSR、ESTP和SRAP三种分子标记初步构建马尾松遗传图谱。对松科其他树种中开发的298对SSR引物
沙地云杉(Picea mongolica)是内蒙古特有的珍稀树种。本试验以沙地云杉的成熟胚为外植体材料,研究了不同培养基、不同激素组合、不同培养条件对沙地云杉胚性愈伤组织诱导和增
摘要:《幼儿园教育指导纲要》中明确提出了生活教育的具体要求。《纲要》的生活教育观,着重强调了幼儿发展的规律性、潜能性、阶段性、自然性等问题。让幼儿愉快、健康地生活,是幼儿园教育的首要目的;让幼儿学习并适应生活,是幼儿园教育的重要内容;让幼儿在生活中学习,是幼儿园教育的主要途径。幼儿园教育要从幼儿的生活入手,贯穿于幼儿一日活动之中,使其更好地了解生活,认识世界,身心健康发展。  关键词:生活教育;学
从2007年5月至2008年7月,作者对京津冀地区共计进行了5次叶蜂区系调查。期间,对于中南林业科技大学昆虫系统与进化生物学实验室模式标本室累积的京津冀地区叶蜂标本,作者也进
经发根农杆菌(rhizogenes)转化的植株不仅表现出生根能力明显提高,而且通常还表现出叶片和花的形态、色素形成、节间长短、生活周期及向地性等性状的可遗传的变异,其中许多变
浪漫主义绘画派大师德拉克洛瓦说:“我们的目的就是要利用色彩来创造美。”生活,总是美好的。亮丽的色彩,带给人的是轻松的心情。绘画如此,服装设计尤其如此。这对于女装企业
通过研究B样条函数在模糊系统和神经网络系统中的应用,探讨了通过B样条函数,结合模糊系统和神经网络的各自特点,构造模糊神经网络的方法,并提出了具体的网络模型以及相应的学习方法
尼克森网联高级总监吕海媛:广告数据能体现市场经济中各行各业的发展状况,也体现出企业整体的营销规划,媒体应用的策略,我们用广告数据这样一个真实在市场上发生的数据来去观
传统零售已经失去了规则的制定权。在电商这个完全竞争行业里,传统零售巨头即使有线下的规模优势也不得不学会适应残酷的丛林法则。不难看出,张近东正试图改变这一现状。
美国是世界上最早播放电视节目的国家,也是目前电视业最为发达的国家之一。在1928年,通用电气公司设在纽约谢奈克塔德(Schenectady,New?摇York)的WGY电视台播出了第一部电视剧《女王的信使》。从那之后,电视业开始在全球悄然兴起。美国的电视业发展可以说最具代表性。在近100年的时间里,各种电视节目挑战着各国观众的眼球,而中国在1958年才真正开始自己的电视历程。因此,研究美国电视节目