目的:探讨程序性死亡配体1(Programmed death ligand 1,PD-L1)对脓毒血症中性粒细胞(Polymorphonuclear neutrophil,PMN)延迟凋亡的调控作用及可能机制。方法:(1)分别采集18例脓毒血症患者和18例健康志愿者的静脉外周血,采用Ficoll密度梯度离心法分离中性粒细胞(Polymorphonuclear neutrophil,PMN)。(2)采用台盼蓝和怀特-姬姆萨混合染色法对PMN的纯度和活力进行检测。(3)分别在体外培养PMN细胞5 h、10 h和20 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡;(4)采用琼脂糖趋化实验检测PMN趋化性。(5)培养18例脓毒血症患者的PMN,通过Annexin V-FITC/PI双染色法分析细胞凋亡率,采用Western Blot技术检测PD-L1的表达量。(6)取健康志愿者的PMN,采用干扰素-γ(Interfero-gama,IFN-γ)和干扰素-γ/脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)激活PD-L1的表达;采用RNA干扰技术沉默PD-L1;采用流式细胞术检测PMN细胞的凋亡率,采用Western blot法检测PD-L1蛋白的表达;分析PMN细胞的凋亡率与PD-L1的关系。(7)取脓毒血症患者的PMN,采用RNA干扰技术沉默PD-L1。采用流式细胞术检测PMN细胞的凋亡率,采用Western blot法检测PD-L1蛋白的表达;分析脓毒血症组PMN细胞的凋亡率与PD-L1的关系。结果:脓毒血症组和健康组PMN纯度和活力均在95%以上,满足下一步实验要求。脓毒血症组外周血PMN在体外培养5 h、10 h和20 h后,细胞凋亡率均显著低于健康组,差异具有统计学意义(P<0.05=。琼脂糖趋化实验结果显示,脓毒血症患者PMN趋化距离显著小于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。PMN经过IFN-γ和IFN-γ/LPS刺激后,凋亡率显著下降(P<0.01),且PD-L1的表达量明显升高。RNA干扰实验结果表明,沉默PD-L1后,PMN凋亡率显著增加(P<0.01)。PMN中PD-L1的表达水平与其凋亡率呈负性相关性(R~2=0.4718)。结论:(1)PD-L1在PMN上的表达水平与其凋亡之间呈负性相关,PD-L1的大量表达可显著延长PMN的寿命;(2)脓毒血症状态时PMN的趋化功能显著受到抑制;(3)PD-L1是调控脓毒血症PMN凋亡延迟的重要分子。