【摘 要】
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利用抑制缩减文库从香蕉中分离到一个cDNA片断,结合RACE技术获得该基因的全长序列.该全长cDNA共含1285个碱基,通过Blastx同源性分析结果显示它与香蕉的一个SAMS基因(GenBank序列号为AF004317,AAB71138)具有82％的碱基同源性,编码的氨基酸顺序有93％同源性,但在cDNA的5和3非编码区同源性较低.设计合适的引物对此基因进行RT-PCR分析表明,正常成熟的香蕉果
【机 构】
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中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海南海口 571101
【出 处】
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中国园艺学会热带南亚热带果树分会第二届学术研讨会暨全国龙眼产业发展论坛
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利用抑制缩减文库从香蕉中分离到一个cDNA片断,结合RACE技术获得该基因的全长序列.该全长cDNA共含1285个碱基,通过Blastx同源性分析结果显示它与香蕉的一个SAMS基因(GenBank序列号为AF004317,AAB71138)具有82％的碱基同源性,编码的氨基酸顺序有93％同源性,但在cDNA的5和3非编码区同源性较低.设计合适的引物对此基因进行RT-PCR分析表明,正常成熟的香蕉果实,采后0天表达量较高,随后降低,至采后12天又达到一个相对较高值后迅速下降;高锰酸钾处理的果实,整个成熟期该基因均表现一个比较高的表达量;乙烯利处理的果实,采后表达量明显下降但处在一个比较稳定的水平.
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柑橘溃疡病(citrus bacterial canker disease)是由地毯黄单胞杆菌柑橘致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.citri)引起的一种世界性检疫性病害,病原基因pthA是柑橘溃疡病亚洲型(A型)致病所必需的因子,其中3个核定位信号区是PthA的重要功能区,在寄主细胞内起识别定位的作用.本研究将pthA的核定位信号NLSs构建正义和反义基因,导入柑橘感
本研究以荔枝幼胚来源的胚性愈伤组织作为受体材料,采用基因枪轰击的方法进行gus基因转化,对荔枝胚性愈伤组织基因枪轰击中各影响因素进行了对比研究,确定了进行荔枝基因枪轰击的最佳轰击条件.采用此最佳轰击条件进行稳定表达转化,经50mg/L的潮霉素筛选获得抗性愈伤组织,并通过体胚发生途径获得了再生植株,经GUS组织化学染色初步确定为表达GUS的转基因植株.
概述了目前分子生物学方法在龙眼种质资源上的应用,包括其核酸提取的方法、分子标记(RAPD、AFLP及SRAP)等在品种鉴定、分类、遗传多样性的应用,胚胎发育、成花等功能基因的分离、鉴定及其转化研究.针对龙眼的分子生物学研究现状存在的问题包括生物技术育种和系统演化研究,提出了今后龙眼种质资源的重点和发展方向.
以3种不同类型的荔枝TREC为材料,通过优化其体胚发生条件,建立荔枝TREC体胚高频率发生再生系统.结果表明,附加适量的ZT的MS培养基适合作为荔枝TREC诱导体胚发生的培养基;同时附加低浓度2,4-D(0.2 mg·L-1)的MS培养基能诱导荔枝TREC高频率的体细胞胚胎发生,结合接种量控制.可部分替代ZT在荔枝TREC体胚发生中的作用.正常成熟后的体胚,在强光照下可以萌发成苗.
以香蕉(Musa spp.)品种“天宝蕉”(Musa spp.,AAA类群)为试验材料,采用根癌农杆菌介导法对香蕉遗传转化体系进行了较为全面的研究,并以该系统进行了ACS反义基因转化香蕉的研究.结果表明,不经预培养的香蕉茎尖横切薄片,侵染前用附加0.1 mg.L-1甘露醇的高渗固体培养基前处理4h,农杆菌重悬液浓度为OD6001.0左右,重悬液中含100 g.L-1的蔗糖,接菌时间为10～15 m
本研究以采用基因枪转化法,将外源htp和gus(uid A)基因转入荔枝(Litchi chinensis Soon.)晚熟优良品种‘下番枝’,并经筛选得到的荔枝转基因抗性胚性愈伤组织(Transgenic resistant embryogenic calli,TREC)细胞系为材料,进行高频率原生质体再生培养和体胚发生研究.研究结果表明：荔枝转基因抗性胚性愈伤组织分离的原生质体,在M12培养基
如何提高转化效率是植物遗传转化中的一个关键问题.本文以香蕉(Musa spp.)的横切薄层切片(tTCL)外植体作为转化受体,通过测定GUS基因瞬时表达率,对影响根癌农杆菌转化香蕉的因素进行了研究,为提高转化效率提供前提.
本研究以荔枝转基因原生质体再生的胚性愈伤组织(Embryogenic callus derived from transgenic protoplasts,TPEC)细胞系和龙眼红核子品种的松散型胚性愈伤组织(Embryogenic callus EC)为材料,采用PA-4000电融合仪进行原生质体电融合参数的研究.本研究结果表明：荔枝TPEC与龙眼EC原生质体融合的适宜电融合参数为原生质体密度为
人工接种PRSV病毒Ys株系,运用RT-PCR技术检测PRSV在抗病突变岭抗1号(LK-1)体内的运转,分析其抗病机制,结果表明,感病品种穗中红接种后24小时即可在接种叶未接种部位检出病毒,第10天则可在接种植株的各部位均可检出病毒,而在岭抗1号植株上,接种后至第10天仍未能在其他部位检测出病毒,表明岭抗1号具有阻碍病毒运转的能力.
根据登录号为AY525367的三类酸性几丁质酶基因设计引物,从香蕉果实cDNA文库中扩增到了该基因.对在乙烯利催熟处理、1-MCP抑制处理以及对照条件下的香蕉果实采后不同时期分别进行了该基因的差异表达分析.结果表明：乙烯利处理的香蕉果实,基因表达量在采后第4天达到高峰,且在果实采后成熟的整个过程中,基因表达的整体水平都比抑制处理和对照的要高,对照处理的果实基因表达呈现出明显的下调趋势;而1-MCP