大豆中疫霉诱导性基因GmaKSTI20启动子的功能分析及人工启动子的构建

来源 :中国植物病理学会第十一届青年学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wodeweibo
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  病原诱导性启动子是抗病转基因育种的一个关键环节,受到病理学家的广泛关注。本研究利用4个不同大豆品种在大豆疫霉侵染过程中全基因表达谱的芯片数据,筛选了疫霉诱导早期快速上调表达的基因,我们挑选其中一个大豆中的胰蛋白酶抑制子基因(GmaKSTI20),进一步克隆该基因启动子区,生物信息学分析发现,该启动子包含很多已报道的病原诱导性顺式元件。将该启动子融合GUS报告基因后,能在烟草瞬时表达和大豆根毛稳定转化系统中介导疫霉诱导的报告基因表达,且其受诱导强度强于已报道的PRla基因。启动子的缺失分析最终鉴定到了一个受疫霉诱导的122bp的高活性片段。将该片段与我们之前实验中鉴定到的113bp活性片段进行人工组合,发现虽然活性依然很高但是相对于单体没有大幅的提高。进一步人工合成该片段的四个重复单元4XD,发现能在不同的表达体系中,高效的驱动报告基因的诱导表达。通过上述研究,我们进一步对全长启动子和人工合成4XD启动子的应用进行了分析,发现它们能在烟草上,驱动来源于致病疫霉的效应因子INF1在侵染点特异性细胞死亡。本研究有望为大豆抗疫霉基因工程和其它作物抗卵菌基因工程提供有应用潜力的启动子。
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