MiR-331-3p通过抑制其靶基因的表达从而参与HBV相关的HCC的发生发展

来源 :四川省医学会第十六次检验医学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:vbwu
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  目的:研究miR-331-3p在HBV相关肝癌发生发展中所起到的作用及其机制.方法:通过基因芯片技术筛选在HepG2和HepG2.2.15细胞系中差异性表达的miRNA,用qRT-PCR的方法对差异表达的miRNA进行验证,选取在HepG2.2.15中表达稳定上升的miR-331-3p作为研究对象,在稳定和瞬时表达HBV的肝癌细胞系中验证HBV对miR-331-3p的作用.通过构建miR-33 1-3p启动子表达质粒,检测HBV对miR-331-3p启动子的作用,研究HBV调节miR-331-3p的机制.用MTS、平板克隆形成等实验检测miR-331-3p对肝癌细胞SMMC7721功能的影响.通过生物信息学网站寻找miR-331-3p的靶基因.通过构建靶基因3-UTR表达质粒,检测miR-331-3p对靶基因3-UTR活性的影响,证明miR-331-3p的靶基因.用QRT-PCR和Western blot分别在mRNA水平和蛋白水平验证miR-331-3p对靶基因的抑制作用,证明HBV、miR-331-3p和靶基因三者之间的关系.构建靶基因真核表达质粒和稳定表达细胞系,检测靶基因的功能.研究HBV能够通过对miR-331-3p及其靶基因的调节,影响HCC的发生发展.结果:在表达HBV的肝癌细胞中,miR-331-3p呈上升的趋势,miR-331-3p能够促进肝癌细胞的增殖.HBV和miR-33 1-3p均能通过抑制靶基因的表达影响肝癌细胞的增殖.结论:miR-331-3p能够通过抑制其靶基因的表达从而参与到HBV相关的HCC的发生和发展中.
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