草莓上一种新的细菌性病害的病原鉴定

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草莓角斑病是草莓生产上危害严重的细菌性病害,其病原菌是草莓角斑病菌(Xanthomonas fragariae),属于薄壁菌门(Gracilicutes)假单胞菌科(Pseudomonaceae)黄单胞菌属。2017年12月北京市昌平区马池口镇某草莓生产基地发现疑似草莓角斑病症状的草莓病珠。本研究分别用PDA,NA,LB和Aay wood四种培养基对来自病株标样的病原菌进行分离纯化。在扫描电镜下观察到菌体呈杆状,具单极鞭,无芽胞,无荚膜,大小约为0.4μm×1.3μm,属于革兰氏染色阴性细菌。进一步采用细菌16s rDNA通用引物和特异性引物XF-F/XF-R进行PCR检测。只有Aay wood培养基中的8个单菌落中有6个单菌落能扩增出550bp的条带,细菌通用引物能扩增出1 400bp左右的目标条带。将核酸片段输入NCBI数据库进行BLAST序列对比,获得同源序列的物种信息和相似度发现8个单菌落与草莓角斑病相似度100%,其中2个单菌落被鉴定为嗜根寡养单胞菌。采用柯赫法则,将病原菌接种到健康的草莓植株上,两周后观察到与草莓角斑病发病症状相同的症状,再分离获得相同的病原菌,再次证实了北京昌平区草莓种植地确实存在草莓角斑病病害。作者也通过阳性克隆技术制作了阳性核酸对照,并在风险评估的基础上给予了防治措施的建议。
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