探讨微小RNA(miR)-155促进Th17分化的作用途径。
方法采用鼠CD4+ T细胞磁珠分离试剂盒分离小鼠脾CD4+T细胞，加促Th17分化的IL-2、IL-23和IL-6刺激培养后，转染miR-155过表达或抑制慢病毒载体，流式检测CD4+ T细胞IL-17的表达；ELISA检测细胞培养液IL-17分泌水平；荧光定量PCR检测miR-155、IL-17A和Ets-1 mRNA的表达。筛选Ets-1的siRNA干扰序列，检测si-Ets与miR-155共同作用对Th17分化的影响。采用单因素方差分析，两两比较采用Dunnett法，组间比较采用t检验。
结果对照未刺激组几乎不表达和分泌IL-17，对照刺激组表达IL-17的细胞和分泌IL-17增多。4组表达IL-17细胞百分比差异有统计学意义(F=160.549，P<0.01)，两两比较miR-155过表达组表达IL-17细胞百分比[(39.86±4.62)%]明显高于对照刺激组[(22.02±2.81)%，P<0.01]和miR-155抑制组[(19.44±1.49 )% ，P<0.01]；miR-155过表达组上清液中IL-17水平[(1 509±136)pg/ml]也显著高于其他2个组[(923±42)pg/ml，P<0.01 ；(767±94)pg/ml](P<0.01)。4组上清液中IL-17表达差异有统计学意义(F= 260.813 ，P<0.01)；两两比较与其他3组相比，miR-155过表达组miR-155高表达(12.53±0.80，1.78±0.14，7.16±0.62 ，6.47±0.92 ，P<0.01)、IL-17A mRNA高表达(46.55±6.71 ，1.01±0.19，15.62±1.26, 14.20±2.73，P< 0.01)，Ets-1 mRNA低表达(0.66±0.10，1.19±0.04, 1.01±0.16, 1.37±0.27，P<0.01)。设计了3条针对Ets-1基因的siRNA，其中si-Ets-2抑制效果最好。si-Ets-2或si-Con与miR-155过表达或抑制慢病毒载体进行共转染，si-Ets-2组均比si-Con组IL-17A mRNA表达上调(17.19±3.58和10.08±0.76 ，t=-3.361 ，P=0.028)，而Ets-1 mRNA表达下调(0.27±0.01和0.74±0.03 ，t=-30.275，P<0.01)，蛋白印迹法检测也可以看出si-Ets-2＃组的Ets-1蛋白表达下降，在miR-155过表达组下降更为明显。
结论miR-155可以通过抑制Ets-1的表达而促进CD4+T细胞向Th17细胞分化。