【摘 要】
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以牧草菊苣品种‘SIXPOINT’种子无菌苗的叶片为起始材料进行了叶肉原生质体分离、培养和植株分化的研究,建立了高频率的植株再生系统.利用10mL酶解液处理鲜叶10～15h,从1g鲜重叶片分离出(4.0～4.5)×106个原生质体,存活率达75％～86％.原生质体分别用两种培养基进行了培养,结果表明:最适合培养基为改良KMP,原生质体的分裂率和植板率分别达到35.2％和16.5％.利用不同的培养方
【机 构】
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北京农业生物技术研究中心,北京100097
【出 处】
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第八届全国植物组培脱毒快繁及工厂化种苗生产技术学术研讨会
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以牧草菊苣品种‘SIXPOINT’种子无菌苗的叶片为起始材料进行了叶肉原生质体分离、培养和植株分化的研究,建立了高频率的植株再生系统.利用10mL酶解液处理鲜叶10～15h,从1g鲜重叶片分离出(4.0～4.5)×106个原生质体,存活率达75％～86％.原生质体分别用两种培养基进行了培养,结果表明:最适合培养基为改良KMP,原生质体的分裂率和植板率分别达到35.2％和16.5％.利用不同的培养方式对原生质体培养的影响进行了比较,包埋培养获得的原生质体分裂率(41.5％)和植板率(22.6％)都优于液体培养.同时对原生质体培养的时间长度与愈伤组织的胚胎发生能力及植株分化频率进行了测试和分析,原生质体培养4～5周为最佳时间,愈伤组织的胚性(78.5％)和分化率(59.6％)最高;当培养时间达到6～7周,胚性愈伤及植株分化的比例分别为51.4％和43.6％;当培养时间达到8～9周,原生质体形成的胚性愈伤频率和植株分化率均出现大幅度下降.原生质体的再生植株在不含激素1/2MS培养基上,部分植株很快地直接生根,未生根的植株再转至1/2MS+IBA0.3mg·L-1+0.1％活性炭可以诱导生根.
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