【摘 要】
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岩藻糖苷酶是研究及改造岩藻糖基化化合物不可缺少的工具酶.本研究对海洋细菌Wenyingzhuangia fucanilytica CZ1127T中的一种岩藻糖苷酶Alf1_Wf进行了纯化、克隆表达及酶学性质研究.综合多种色谱分离方法,得到电泳纯蛋白条带,将质谱分析与CZ1127T基因组信息结合,得到该酶的编码基因序列.对Alf1_Wf的基因进行克隆,并在E.coli BL21中实现了酶的重组表达.
【机 构】
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中国海洋大学,山东青岛266003
【出 处】
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2016年中国水产学会水产品加工与综合利用分会学术年会
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岩藻糖苷酶是研究及改造岩藻糖基化化合物不可缺少的工具酶.本研究对海洋细菌Wenyingzhuangia fucanilytica CZ1127T中的一种岩藻糖苷酶Alf1_Wf进行了纯化、克隆表达及酶学性质研究.综合多种色谱分离方法,得到电泳纯蛋白条带,将质谱分析与CZ1127T基因组信息结合,得到该酶的编码基因序列.对Alf1_Wf的基因进行克隆,并在E.coli BL21中实现了酶的重组表达.生物信息学分析发现Alf1_Wf包含GH29和CBM35结构域,是一种新颖的糖苷酶结构.Alf1_Wf能够水解对硝基岩藻糖和α-1,4岩藻糖苷键,并能够酶解低分子量岩藻聚糖硫酸酯.本研究结果为海洋来源岩藻糖苷酶的应用奠定了基础.
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