【摘 要】
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为了在体外研究GPS表达对猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSV易感细胞Mac-145的影响，本研究通过慢病毒介导成功构建稳定表达GP5蛋白的Marc-145细胞系;首先对该细胞系的细胞活性，细胞凋亡检进行了检测，结果显示GP5在Marc-145内表达并未影响细胞活性和诱导细胞凋亡;然后为了分析GP5蛋白表达对PRRSV感染的影响，利用不同致病性PRRSV毒株VR-2332,HP-PRRSV/JXA1,
【机 构】
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西北农林科技大学动物医学院兽医免疫研究所 农业部兽用药物与兽医生物技术陕西科学观测实验站,陕西杨凌712100
【出 处】
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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会
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为了在体外研究GPS表达对猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSV易感细胞Mac-145的影响，本研究通过慢病毒介导成功构建稳定表达GP5蛋白的Marc-145细胞系;首先对该细胞系的细胞活性，细胞凋亡检进行了检测，结果显示GP5在Marc-145内表达并未影响细胞活性和诱导细胞凋亡;然后为了分析GP5蛋白表达对PRRSV感染的影响，利用不同致病性PRRSV毒株VR-2332,HP-PRRSV/JXA1,HP-PRRSV/SD 16分别感染高效表达GP5的Marc-145细胞，结果显示，GP5蛋白在Marc-145细胞内的预表达显著抑制了PRRSV的后续感染;为了明确对PRRSV感染的抑制作用是阻断了病毒的吸附还是抑制了病毒的复制，通过荧光定量PCR对病毒的吸附和病毒吸附后在细胞的复制进行了测定，结果显示GPS蛋白表达没有影响病毒对细胞的吸附，而是抑制了病毒在细胞内的复制，通过对1型干扰素基因转录水平和启动子活性进行分析，GP5的表达导致细胞内INF-β的mRNA水平显著升高，启动子活性明显增强。由此，GPS蛋白体外细胞内表达对PRRSV感染具有明显的抑制作用，这种抑制作用极可能是由GP5的表达诱导了细胞内INF-β的产生导致的。
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