【摘 要】
：
目的 α/β-珠蛋白肽链合成不平衡引起游离α,肽链相对过剩的毒害作用是β-地中海贫血(简称β-地贫)主要发病学环节。若能同时采用RNA干扰技术抑制α-珠蛋白基因的表达和反义RNA技术恢复β654-地贫正常的剪接模式则是治疗β654-地贫的可行途径。本研究在β654-地贫模型小鼠水平探讨RNA干扰和反义RNA载体直接注射法治疗β654-地贫的可行性。方法 针对鼠α[珠蛋白基因和β654-异常剪切位点
【机 构】
：
200040上海,上海交通大学医学遗传研究所
【出 处】
：
第八次全国医学遗传学学术会议(中华医学会2009年医学遗传学年会)
论文部分内容阅读
目的 α/β-珠蛋白肽链合成不平衡引起游离α,肽链相对过剩的毒害作用是β-地中海贫血(简称β-地贫)主要发病学环节。若能同时采用RNA干扰技术抑制α-珠蛋白基因的表达和反义RNA技术恢复β654-地贫正常的剪接模式则是治疗β654-地贫的可行途径。本研究在β654-地贫模型小鼠水平探讨RNA干扰和反义RNA载体直接注射法治疗β654-地贫的可行性。方法 针对鼠α[珠蛋白基因和β654-异常剪切位点分别构建H1启动子小RNA(siRNA)干扰载体和反义RNA载体,然后将它们分别转染Mel细胞和-HeLaβ654细胞,培养三周后收获细胞,RT-PCR和定量RT-PCR测定α珠蛋白基因和β654 mRNA表达水平以证明载体构建的正确性及其抑制α珠蛋白基因表达和恢复β654异常剪接的有效性；继而将siRNA和反义RNA载体经尾静脉直接注射至β654-地贫模型小鼠体内,定期测定治疗鼠α珠蛋白基因和β654 mRNA表达水平以及血液学参数,共四周；同时观察骨髓、肝、脾的组织学变化情况。
其他文献
We here report that miR-17-92 cluster is a novel target for p53-mediated transcriptional repression under hypoxia.We found the expression levels of miR-17-92 cluster were reduced in hypoxia-treated ce
TAK1 plays an easential role in proinflammatory cytokine TNFα and IL-1β-induced IKK/NF-κB and JNK/AP-1 activation.Here we report that TNFα and IL-1β induce K63-linked TAK1 polyubiquitination at the Ly
胃癌是严重危害人类健康的恶性肿瘤，其分子机制的研究一直是肿瘤领域的热点问题。许多研究表明S100A4高表达与胃癌侵袭转移相关。但是关于S1 00A4表达调控机制的研究，目前报道尚少。微环境低氧是大多数实体瘤的重要特征，低氧通过调节肿瘤细胞中某些转录因子、肿瘤相关基因等表达而影响肿瘤细胞的生物学特性，使其适应低氧环境，并促进肿瘤发生发展及转移。本课题组应用生物信息学软件在S100A4基因的调控区预测
目的 应用脂质体转染技术转染NOR1入HepG2细胞,进一步探讨NOR1基因在肝癌细胞中对生长因子受体结合蛋白2(Grb2)的影响.方法 应用脂质体转染技术,建立稳定高表达NOR1基因的HepG2细胞,利用cDNA微阵列技术对差异基因进行筛选,对差异基因Grb2在转染NOR1基因(pcDNA3.1(+)NOR1/HepG2),转染空质粒(pcDNA3.1(+)/HepG2),以及正常HepG2细胞
目的 先天性全身终毛增多症(CGHT)是一种罕见的遗传性毛发疾病，近期对人类CGHT家系和一个散发病例的研究发现该病致病原因为染色体17q24.2-q24.3区域的拷贝数变异(CNV)，根据生物信息学分析推测此CNV可能通过影响CNV区域附近的SOX9基因在毛囊的表达水平而引起毛发过度生长.本研究计划通过建立K14启动子驱动的毛囊特异表达的人SOX9转基因小鼠，为研究CGHT发生的分子机理提供直接
微核试验(micronucleus test,MNT)是遗传毒理学研究中快速检测染色体损伤的一种常用技术,在各种化合物或药物遗传毒性或诱变性的快速初筛方面具有重要应用价值。因此,小鼠红细胞微核标本的制备与观察是医学遗传学实验教学中的一个重要项目。然而,目前国内医学院校开设的小鼠微核实验多以骨髓多染性红细胞(polychromatic erythrocyte,PCE)作为观察对象。制备微核标本时,一
目的 通过高龄孕妇产前胎儿染色体核型结果 分析，探讨高龄妊娠胎儿染色体异常的风险.方法 通过高龄孕妇绒毛组织活检39例、羊水穿刺1062例、脐带血穿刺101例和妊娠流产物44例进行培养，并染色体核型分析.结果 39例绒毛组织标本中染色体异常核型7例，异常率为17.95％：1062例羊水细胞标本中染色体异常核型24例，异常率为2.26％；101例脐血标本中染色体异常核型14例，异常率为13.86％；
目的 评价唐氏综合征(Downs syndrome,DS)产前血清学筛查的临床应用价值.方法 用全自动时间荧光免疫分辨仪对23921例妊娠14～21周的孕妇进行血清甲胎蛋白(AFP)、游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位(Free-β-HCG)和游离雌三醇(uE3)检测,结合孕妇年龄、体重、孕周以及双胎、糖尿病、吸烟等相关因素,应用Multicalc软件进行风险评估.以风险率1：270为切割点,≥1∶2
目的 用ARMS直接鉴定结合测序法对再次孕育的粘多糖贮积症Ⅱ型(MPSⅡ)高危胎儿进行快速产检，从而及时而高效地防患病胎出生，真正实现优生。方法 首先应用尿粘多糖定性检测法对先证者进行初诊，然后用微量快提法制备DNA模板，用普通引物PCR、DHPLC分析法对先证者及其父母的IDS基因进行突变检测，并对检出有异常峰形的突变样品进行直接测序。对检出的新突变，分别采用正常对照组与患者实验组的比对鉴定、跨
目的 以求在更大的范围内了解中国Duchenne型肌营养不良(DMD)/Becker型肌营养不良(BMD)患者基因缺失的分布规律,并探索检测技术,为制定合理的DMD/BMD患者的基因缺失检测奠定一定得基础.方法 我们用Chamberlain设计的9对引物(系列Ⅰ)和Beggs设计的9对引物(系列Ⅱ),以及另外10对引物(系列Ⅲ),共28对引物以多重PCR技术对20例临床诊断为DMD或BMD患者的D