【摘 要】
：
本文运用代谢工程的研究策略,以Enterobacter sp.CN1为出发菌株,研究丙酮酸甲酸代谢途径和对辅酶NADH和NAD+的氧化还原反应有影响的途径,通过λred同源重组实验,构建产氢
【机 构】
：
汕头大学生物系 广东汕头515063
【出 处】
：
广东省遗传学会第九届代表大会暨学术研讨会
论文部分内容阅读
本文运用代谢工程的研究策略,以Enterobacter sp.CN1为出发菌株,研究丙酮酸甲酸代谢途径和对辅酶NADH和NAD+的氧化还原反应有影响的途径,通过λred同源重组实验,构建产氢竞争途径基因缺失菌株：通过运用同源重组方法,分别构建乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)缺失重组菌,获得了乳酸脱氢酶基因缺失重组菌株.CN1△ldh工程菌利用葡萄糖产氢效率为1007.98ml/L,比野生菌CN1的产氢量增加17.3％.在利用丙酮酸钠产氢时比野生菌CN1的产氢量增加18.1％.在甘油代谢产氢过程中,产氢量增加更在明显,敲除菌CN1△ldh产氢效率比野生菌CN1的产氢量增加1.8倍.通过运用同源重组方法构建乙醇脱氢酶(Alcohol dehydrogenase,ADH)缺失重组菌和延胡索酸还原酶(fumarate reductase,FRD)缺失重组菌和NADH脱氢酶(NADH dehydrogenase,NUO)缺失重组菌.相对野生菌CN1的产氢量的变化为：CN1△adh产氢减少41.3％,CN1△frd增加12.6％,CN1△Nuo增加21.4％.结合甲酸代谢产氢和NADH途径产氢构建了乳酸脱氢酶基因和延胡索酸还原酶双缺失重组菌以及乳酸脱氢酶基因和NADH脱氢酶(NADH dehydrogenase,NUO)双缺失重组菌.双敲除菌在厌氧生长条件都受到一定的抑制,CN1△ldh△frd的生长被抑制程度更明显一些.两个双敲除菌产氢量分别增加了32.5％和24.5％.说明结合甲酸途径产氢和NADH途径产氢能够进一步提高产氢能力.
其他文献
结核分枝杆菌耐药突变的快速诊断对结核病的早期有效治疗和控制至关重要,然而传统的结核杆菌药敏试验需要长达几周的时间,所以我们需要新的方法减少诊断时间,缩小传播的
浒苔的爆发对海水养殖、海洋生态环境及沿海旅游业的发展都非常不利.目前对浒苔的综合利用的研究还比较少,已有报道浒苔多糖具有硫酸多糖的生理活性.本研究以喜好浒苔为
浒苔的爆发对海水养殖、海洋生态环境及沿海旅游业的发展都非常不利；黄斑篮子鱼喜好以浒苔为食料.通过使用PCR-DGGE、克隆文库和RFLP的方法，本文对篮子鱼养殖环境的微生物
近20余年，与体重超重/腹型肥胖、2型糖尿病、代谢综合征相关的代谢相关脂肪性肝病的患病率和发病率增长迅速，现已累及全球25%以上的人口，在健康查体B超发现的脂肪肝患者中90%以
目的 探讨Wolf-Hirschhom综合征的临床表型及遗传效应。方法 采用细胞培养及G显带的方法,对一例疑似Wolf-Hirschhom综合征的患儿及其父母进行细胞核型分析。结果 先证者
目的 分析4个家系7例晚发型糖原贮积病Ⅱ型患者之临床特点和基因型，以提高对该病的认识.方法 收集患者临床资料，并行酸性α-葡糖苷酶(GAA)基因突变分析.结果 7例患者分别来
3月21日是世界睡眠日。自2001年起，这一项关注全球人群睡眠健康的活动已经走过了20个年头。睡眠作为占据人类一生近1/3时间的重要生理活动，理应得到高度的重视。在我国，有近四成
微生物无处不在，作为地球上多样化最高、数量最多、进化最早的生命形式，微生物驱动着物质循环和能量流动。伴随着经济高速发展，环境污染问题日益突出，微生物以其代谢的多样性
目的 HCMV在免疫低下人群中可引起严重疾病,其UL/b(UL133-UL151)区域为HCMV临床病毒株的独有区域,推测该区域与HCMV的临床致病性高度相关,本课题应用EGS技术应用沉默该区
目的 观察Myozyme对依赖呼吸机辅助通气的晚期晚发型糖原贮积病Ⅱ型患者的治疗效果。方法 参照药品说明书要求，对1例晚发型糖原贮积病Ⅱ型患者进行Myozyme治疗，剂量为20 mg