实时荧光定量RT-PCR反应结合熔解曲线分析鉴别猪瘟强毒与疫苗弱毒的研究

来源 :中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Jianhcn
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  为建立一种能够区分猪瘟病毒(cSFv)强毒与弱毒疫苗c株的sYBR Green I荧光定量RT—PcR结合熔解曲线分析方法,本研究对GenBank中登录的25株csFv强毒株和兔化弱毒疫苗c株全基因组序列进行比较分析。设计一对共用下游引物以及分别针对csFv强毒株与弱毒疫苗的特异性上游引物,其Tm值分别为84.5±O.5℃和88.5±0.5℃,熔解曲线分析显示为单特异峰。检测结果显示本实验建立的鉴别csFV强毒感染与弱毒疫苗的荧光定量RT.PcR结合熔解曲线分析方法特异性强,对其他相关病毒无特异性扩增;敏感性高,最低检出量为5×RID50的细胞疫苗基因组拷贝;重复性好;并且扩增效率高、线性范围广、检测时间短,可对免疫猪群中csFv强毒感染做出快速准确的鉴别检测,为有效防治猪瘟提供依据。
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