【摘 要】
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[目的]真核细胞翻译起始因子5A2(eukaryotic translation initiation factor 5A2,EIF5A2)基因是近年来新发现的一个癌基因,它定位于人类染色体3q26.2,该区域的扩增常见于
【机 构】
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哈尔滨医科大学医学遗传学研究室哈尔滨医科大学医学遗传学研究室;黑龙江省生物医药工程重点实验室
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[目的]真核细胞翻译起始因子5A2(eukaryotic translation initiation factor 5A2,EIF5A2)基因是近年来新发现的一个癌基因,它定位于人类染色体3q26.2,该区域的扩增常见于多种恶性肿瘤中.本研究的目的在于分析人EIF5A2基因启动子区的结构及与其作用的反式作用因子,为进一步研究该基因的表达调控机制奠定基础.[方法]本研究首先选取该基因自转录起始位点上游2000 bp基因组DNA序列作为研究对象,分别构建四种不同长度截短片段的重组质粒,利用pGL3报告基因系统分析各截短片段的活性,最终确定EIF5A2基因核心启动区.进一步应用定点突变、凝胶阻滞(EMSA)和染色质共沉淀(ChIP)技术对核心启动区内的潜在的转录因子结合元件进行确认.此外,使用实时定量PCR方法对EIF5A2基因与目的转录因子在卵巢癌组织中的表达情况进行了检测,并对二者在卵巢癌中转录水平的相关性进行了分析.
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