【摘 要】
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目的：乳腺丝氨酸蛋白酶抑制剂(Maspin)是丝氨酸蛋白酶抑制剂(seprin)家族的成员,对肿瘤细胞的侵袭和新生血管形成等具有抑制作用.以往人们对Maspin的研究主要集中于其对肿瘤细胞生物学特性的影响,而对于Maspin蛋白的免疫调节作用研究几无涉猎.本研究旨在探讨Maspin对巨噬细胞功能的影响.方法：通过脂质体法转染及G418压力筛选方法构建过表达Maspin的CHO细胞株,用其培养上清刺
【机 构】
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东北师范大学药物基因和蛋白筛选国家工程实验室,长春130021
【出 处】
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第三届东北三省暨内蒙古自治区免疫学学术会议
论文部分内容阅读
目的：乳腺丝氨酸蛋白酶抑制剂(Maspin)是丝氨酸蛋白酶抑制剂(seprin)家族的成员,对肿瘤细胞的侵袭和新生血管形成等具有抑制作用.以往人们对Maspin的研究主要集中于其对肿瘤细胞生物学特性的影响,而对于Maspin蛋白的免疫调节作用研究几无涉猎.本研究旨在探讨Maspin对巨噬细胞功能的影响.方法：通过脂质体法转染及G418压力筛选方法构建过表达Maspin的CHO细胞株,用其培养上清刺激小鼠原代巨噬细胞、传代单核巨噬细胞RAW264.7及人巨噬细胞THP1,通过鸡红细胞吞噬实验检测巨噬细胞的吞噬能力,通过qRT-PCR及ELISA方法检测细胞上清对巨噬细胞产生IL-6、TNF-a、IL-1 β及TGF-β的影响.结果：成功构建了稳定表达并分泌Maspin的CHO细胞株.过表达Maspin的细胞上清可明显抑制小鼠原代巨噬细胞、传代单核巨噬细胞RAW264.7及人巨噬细胞THP1吞噬鸡红细胞的能力；qRT-PCR及ELISA结果显示,过表达Maspin的细胞上清可明显抑制小鼠原代巨噬细胞、传代单核巨噬细胞RAW264.7及人巨噬细胞THP1中四种炎症因子,即IL-6、TNF-α、IL-1β及TGF-β的表达及分泌.结论：过表达Maspin细胞上清可抑制巨噬细胞的吞噬功能 ,及细胞因子分泌功能.
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