我国不规则毛霉交配型基因MAT的初步分析

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目的本研究以我国各地区报告的引起原发性慢性皮肤毛霉病的不规则毛霉(Mucor irregularis)17例为研究对象,对MAT基因位点的结构进行研究,统计分析这17株不规则毛霉菌株的交配型比例及进化关系。方法以卷曲毛霉等已报导的MAT基因位点作为查询序列,搜索NCBI不规则毛霉基因组数据库,获取该菌种MAT基因位点序列。特异性PCR扩增17例菌株的交配型决定基因sex M/sex P,统计分析其比例。将已知交配型为sex M(-)的标准株与其他16例菌株分别进行交配实验,以验证菌株的交配类型。利用Mega5.1软件对17例菌株进行聚类分析。结果这17例不规则毛霉菌株,均能扩增出包括磷酸丙糖转运蛋白、Sex P/M及RNA解旋酶串联的MAT基因位点。其中14株扩增出sex M基因,仅3株能扩增出sex P基因,且其中一例的sex P存在2 bp的缺失。交配型测定结果表明,仅有2例菌株为sex P(+)型菌株,说明sex P基因的碱基缺失,造成菌株交配型的改变。sex M(-)型菌株尽管存在较多SNP,但在系统发育树中仍隶属同一大类群,而2例sex P(+)菌株分属两条分支。结论我国报导的不规则毛霉多为sex M(-)型菌株,交配型基因对不规则毛霉的性别控制和遗传进化起着决定性作用。本研究有助于对其他接合真菌交配型基因的克隆、系统分类与进化研究,同时对毛霉菌的亲缘关系、病害防治等具有重要意义。
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