【摘 要】
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目的：了解我院鲍曼不动杆菌(AB)临床株对舒巴坦的耐药现状；探讨耐舒巴坦AB耐药表型与TEM-1基因的关系及PBPs在舒巴坦耐药机制中的可能作用。探讨外排泵与舒巴坦耐药性相关否；构建舒巴坦敏感株插入突变文库,探索AB对舒巴坦其他可能耐药机制。方法：琼脂稀释法测定舒巴坦对临床分离225株非重复MDR-AB的MIC值；PCR扩增TEM基因,测序明确TEM基因亚型,分析舒巴坦耐药表型与TEM-1编码基因
【机 构】
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四川大学华西医院感染性疾病中心生物治疗国家重点实验室-感染性疾病研究室
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目的：了解我院鲍曼不动杆菌(AB)临床株对舒巴坦的耐药现状；探讨耐舒巴坦AB耐药表型与TEM-1基因的关系及PBPs在舒巴坦耐药机制中的可能作用。探讨外排泵与舒巴坦耐药性相关否；构建舒巴坦敏感株插入突变文库,探索AB对舒巴坦其他可能耐药机制。方法：琼脂稀释法测定舒巴坦对临床分离225株非重复MDR-AB的MIC值；PCR扩增TEM基因,测序明确TEM基因亚型,分析舒巴坦耐药表型与TEM-1编码基因携带的关系；随机选TEM-1基因阳性舒巴坦耐药株22株、中介13株、敏感2株,荧光定量PCR法测TEM-1转录水平差异,分析TEM-1转录水平与舒巴坦MIC值间的关系；随机选40株不同MIC值菌株PCR扩增PBP1a、PBP3基因并测序,探索是否存在可致舒巴坦耐药的错义突变或无义突变；用外排泵抑制剂探索外排泵作用与舒巴坦耐药性是否有关；选择舒巴坦敏感临床株b38,构建EZ-Tn5插入突变文库,筛选舒巴坦耐药菌株,检测舒巴坦对所筛选耐药突变株的MIC值,反向PCR技术分析舒巴坦耐药突变株的侧翼序列,探索AB对舒巴坦的其他可能耐药机制。
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