猪瘟病毒环介导等温扩增(RT—LAMP)快速检测方法的建立和应用

来源 :中国畜牧兽医学会2009学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huangyuli
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本文利用环介导等温扩增技术(LAMP ),建立了检测猪瘟病毒(CSFV)的快速诊断方法。该方法针对CSFV 5端保守基因成功设计了6条特异引物,经条件优化后,在63℃恒温条件下只需45min,就能很好的扩增CSFV目的片段。将CSFV和其它六株与猪瘟病毒相关的病毒进行RT-LAMP扩增,验证了该方法的特异性;RT-LAMP产物经XhoI酶酶切来确定产物的即为目的片段;RT-LAMP对CSFV的最低检测量为1×101个基因拷贝,是RT-PCR敏感度的100倍;用CSFV RT-LAMP法和RT-PCR检测方法分别对27分临床样本进行检测,结果证明CSFV RT-LAMP在检测CSFV的快速、敏感和特异方面更加可靠和方便。
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