【摘 要】
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[目的]从鲍鱼内脏提取有生物活性的鲍鱼内脏多糖(AVP),检测其抑菌、抗肿瘤活性.[方法]以皱纹盘鲍内脏为材料,采用碱性蛋白酶酶解、Sevage法和反复冻融法除蛋白、过氧化氢除色素等方法分离纯化得到了高纯度的AVP.采用双层平板法测定其抑菌作用；采用MTT法、AO/EB染色法等测定其对胃癌细胞MGC803的增殖抑制作用.[结果]分离纯化得到的AVP总糖含量为46.27g/100g,己糖醛酸、硫酸根
【机 构】
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厦门大学生命科学学院,福建厦门361102
【出 处】
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2016年中国水产学会水产品加工与综合利用分会学术年会
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[目的]从鲍鱼内脏提取有生物活性的鲍鱼内脏多糖(AVP),检测其抑菌、抗肿瘤活性.[方法]以皱纹盘鲍内脏为材料,采用碱性蛋白酶酶解、Sevage法和反复冻融法除蛋白、过氧化氢除色素等方法分离纯化得到了高纯度的AVP.采用双层平板法测定其抑菌作用；采用MTT法、AO/EB染色法等测定其对胃癌细胞MGC803的增殖抑制作用.[结果]分离纯化得到的AVP总糖含量为46.27g/100g,己糖醛酸、硫酸根、氨基己糖含量分别为17.44、16.98和0.65g/100g,单糖组成主要为D-半乳糖、D-木糖、D-甘露糖、D-葡萄糖和D-葡萄糖醛酸.急性经口毒性试验结果表明为无毒.测定AVP(6.25,12.5,25,50mg/mL)的抑菌作用,结果表明,AVP对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌都具有很好的抑菌作用,对铜绿假单胞菌有一定的抑菌作用,对枯草芽孢杆菌无抑菌作用.测定AVP(20,40,60,80,100μg/mL)对胃癌细胞MGC803的增殖抑制作用,MTT结果表明,AVP处理细胞24h的半抑制浓度为22.87±0.53μg/mL,48 h的半抑制浓度为18.71±0.60μg/mL.倒置相差显微镜观察可见AVP处理48h后,随着AVP浓度的增加,细胞分布逐渐变稀松,数量减少,细胞边缘变粗糙,大量细胞变圆皱缩.AO/EB染色法观察可见处理后的细胞发出明亮的黄光和橘红光的细胞核比例明显增加,表明大量的细胞发生了染色质的凝集和细胞膜的破损.细胞迁移能力实验显示其细胞迁移率随着药物浓度的增大逐渐降低.以上结果表明AVP可以诱导胃癌细胞MGC803凋亡.而western blotting结果显示bax/bcl2的比值增加,推测AVP可能通过促进线粒体膜电位的改变,进而激活下游的capase3,诱导细胞凋亡.同时,AVP对人正常胃细胞GES1的增殖基本没有影响,表明无细胞毒性.[结论]AVP具有抑菌和抑制胃癌细胞增殖的生理活性.
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