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[期刊论文] 作者:温立斌, 何孔旺, 杨汉春,, 来源:中国农业科学 年份:2010
【目的】确定猪体内存在与猪圆环病毒2型核苷酸序列高度同源的因子。【方法】首先利用PCR方法对来自临床表现为猪断奶后多系统衰竭综合征的猪血清所抽提的DNA进行扩增,根据获...
[期刊论文] 作者:刘洁, 夏兴霞, 王永山, 张雪寒, 费荣梅, 何孔旺,, 来源:中国预防兽医学报 年份:2010
为建立快速检测鼠感染大肠杆菌O157∶H7后的抗体,本研究采用颗粒为20nm的胶体金溶液标记纯化的羊抗鼠IgG,制备金标探针,喷涂于玻璃纤维膜上;将大肠杆菌O157∶H7抗原和抗大肠...
[会议论文] 作者:胡东波,何孔旺,倪艳秀,周俊明,俞正玉,范红结, 来源:中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会 年份:2010
用猪链球菌2型SS2-1株人工感染健康家兔。分别以静脉、肌肉、皮下、滴鼻、口服五种途径感染109CFU,结果前四者均引起发病或死亡,口服不发病,以静脉感染发病最为急性。分别静脉注射109、108、107、106、105CFU,分别肌肉注射108、106 CFU,结果均发病并有死亡,结果提示感......
[期刊论文] 作者:夏兴霞,王永山,孟祥升,朱国强,张雪寒,何孔旺, 来源:中国动物传染病学报 年份:2010
用E.coliO157∶H7菌体免疫BALB/c鼠,制备免疫脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了16株分泌单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株。其中,1D3、2E7和2H7三株为O157∶H7特异单克隆抗体,...
[会议论文] 作者:夏兴霞,刘洁,王永山,诸玉梅,欧阳伟,张雪寒,何孔旺, 来源:中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会 年份:2010
将E.coli O157:H7用甲醛灭活超声破碎,免疫BALB/c鼠,制备免疫脾细胞,与SP/20骨髓瘤细胞融合,建立了7株分泌抗E.coliO157:H7单克隆抗体(mAbs)的杂交瘤细胞株,分别命名为F5、B8、E7、G9、G11、F1和C3,Ig亚类分别是IgG2aκ、IgG2aκ、IgG1κ、IgMκ、IgMλ、IgMκ和IgG2aκ......
[期刊论文] 作者:王芳,胡波,任雪枫,范志宇,张则斌,徐为中,何孔旺, 来源:华北农学报 年份:2010
用RT-PCR方法对ConA刺激后的新西兰白兔外周血淋巴细胞(PBMC)扩增家兔γ-干扰素(IFN-γ)基因并进行测序,测序结果显示,与GenBank公布的序列核苷酸同源性达到99.4%~99.6%,氨基酸同...
[期刊论文] 作者:胡波,魏后军,王芳,范志宇,徐鹏,徐为中,薛家宾,何孔旺, 来源:畜牧兽医学报 年份:2010
本研究旨在建立检测兔群鼻拭子中兔出血症病毒(RHDV)的RT-PCR方法,研究健康免疫兔群是否存在携带RHDV现象。根据GenBank上公布的RHDVvp60基因保守序列,设计了1对特异性引物,经c...
[期刊论文] 作者:潘群兴,王永山,何孔旺,欧阳伟,王晓丽,诸玉梅,夏兴霞, 来源:中国预防兽医学报 年份:2010
为增强表位疫苗的免疫原性,本研究将O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1中编码T细胞表位肽(aa 21~aa 40)序列连接于猪细小病毒(PPV)VP2的5'端,并插入到杆状病毒供体质粒pFastBac HTA中,构建成重......
[会议论文] 作者:潘群兴;王永山;何孔旺;欧阳伟;王晓丽;诸玉梅;夏兴霞;, 来源:中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会 年份:2010
将O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1上T细胞表位肽(第21~40残基)基因嵌合在PPV VP2的N端,克隆到杆状病毒供体质粒pFastBac HTA中,构建成重组转座载体pFastBac-FMDV VP1:PPV VP2,转化含有穿...
[期刊论文] 作者:温立斌,何孔旺,杨汉春,郭容利,李成仁,钟书霖,茅爱华,倪艳, 来源:江苏农业学报 年份:2010
为了探讨中国猪群TTV的感染现状以及是否存在新的基因亚型,基于TTV1和TTV2相对保守的5’非翻译区(5’UTR)设计引物,采用PCR法对2008~2009年采集于中国江苏省的138份猪血清进行了检...
[期刊论文] 作者:温立斌,何孔旺,杨汉春,郭容利,钟书霖,周俊明,李成仁,陈梦, 来源:江苏农业学报 年份:2010
为评价高分辨熔点曲线分析在快速鉴别类猪圆环病毒因子P1和猪圆环病毒2型中的应用。在Cor-bett Rotor-Gene 6000定量PCR仪上,利用EvaGreen荧光染料对靶核苷酸序列进行扩增,建...
[期刊论文] 作者:张雪寒,何孔旺,茅爱华,周俊明,俞正玉,温立斌,倪艳秀,郭容, 来源:中国农业科学 年份:2010
【目的】克隆、表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7转位紧密素受体(Tir)基因,并研究其抗原性。【方法】选用pET28原核表达载体,体外构建Tir原核表达重组菌,并在大肠杆菌中获得高效......
[期刊论文] 作者:温立斌,何孔旺,杨汉春,郭容利,俞正玉,茅爱华,倪艳秀,张雪, 来源:华北农学报 年份:2010
为探讨类猪圆环病毒2型因子P1感染对猪抗病毒蛋白分子mRNA转录的影响,将P1分子克隆接种30日龄健康广西巴马小型猪,利用实时荧光定量PCR技术对猪外周血单个核细胞抗病毒蛋白分...
[期刊论文] 作者:张雪寒,何孔旺,卢维彩,赵攀登,温立斌,李彬,郭容利,王小敏, 来源:华北农学报 年份:2010
为了更好防治由出血性大肠杆菌O157∶H7引起的疾病,尝试研制基因工程疫苗,其中亚单位疫苗时具有很大优势。构建表达tir和stx1b的融合基因,将tir基因中间295个氨基酸残基(Tir29...
[期刊论文] 作者:李超美,王芳,蔡少平,任雪枫,胡波,范志宇,徐为中,何孔旺, 来源:江苏农业学报 年份:2010
为建立检测兔出血症病毒(RHDV)抗体的间接ELISA方法,应用杆状病毒表达系统表达的RHDV VP60包被酶标板,经间接ELISA的最佳反应条件优化试验确定:抗原的包被浓度为4.62μg/ml,标准...
[会议论文] 作者:刘洁[1]夏兴霞[2]王永山[2]张雪寒[2]费荣梅[3]何孔旺[2], 来源:中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会 年份:2010
用颗粒为20nm的胶体金溶液标记纯化的羊抗鼠IgG,制备金标探针,喷涂于玻璃纤维膜上;将大肠杆菌O157:H7抗原和抗大肠杆菌O157:H7单克隆抗体F1分别包被于硝酸纤维素膜上作为检测线和......
[会议论文] 作者:胡东波[1]何孔旺[2]倪艳秀[2]周俊明[2]俞正玉[2]范红结[3], 来源:中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会 年份:2010
用猪链球菌2型SS2-1株人工感染健康家兔。分别以静脉、肌肉、皮下、滴鼻、口服五种途径感染109CFU,结果前四者均引起发病或死亡,口服不发病,以静脉感染发病最为急性。分别静脉注......
[会议论文] 作者:张雪寒,周俊明,俞正玉,茅爱华,吕立新,何孔旺,卢维彩,赵攀登,温立斌,李彬,郭容利,王小敏,倪艳秀, 来源:中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会 年份:2010
为了更好防治由出血性大肠杆菌O157:H7引起的疾病,尝试研制基因工程疫苗,其中亚单位疫苗时具有很大优势。构建表达tir和stxb的融合基因,将tir基因中间295个氨基酸残基(Tir295)与stxB亚基基因72个氨基酸串联构建pGEX-stx2b-Tir295-stx1b重组质粒,将其转化于BL21(DE3),......
[期刊论文] 作者:温立斌,何孔旺,杨汉春,郭容利,俞正玉,茅爱华,倪艳秀,张雪寒,周俊明,吕立新,李彬,王小敏,WENLi-bin,HEKong-wang,YANGHan-chun,GUORong-li,YUZheng-yu, 来源:华北农学报 年份:2010
[会议论文] 作者:张雪寒[1]周俊明[1]俞正玉[1]茅爱华[1]吕立新[2]何孔旺[1]卢维彩[1]赵攀登[1]温立斌[1]李彬[1]郭容利[1]王小敏[1]倪艳秀[1], 来源:中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会 年份:2010
为了更好防治由出血性大肠杆菌O157:H7引起的疾病,尝试研制基因工程疫苗,其中亚单位疫苗时具有很大优势。构建表达tir和stxb的融合基因,将tir基因中间295个氨基酸残基(Tir295)与s...
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