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目的 建立4个产地21批杜仲Eucommia ulmoides雄花的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱，为杜仲雄花的质量控制提供参考。方法 采用HPLC法，色谱柱为Agilent HC-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5.0μm）；流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液；梯度洗脱；体积流量0.8 mL/min；柱温35℃；程序变化波长；进样量20μL。通过相似度评价、偏最小二乘法分析（partial least squares discriminant analysis,PLS-DA）、系统聚类分析（hierarchical cluster analysis,HCA）以及气候因子相关性分析等对杜仲雄花指纹图谱进行分析评价。结果 建立4个产地杜仲雄花HPLC指纹图谱，共标定15个共有峰，指认出其中6个色谱峰，分别为桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷、芦丁、槲皮素；21批杜仲雄花指纹图谱与对照图谱的相似度为0.911～0.989;PLS-DA分析表明不同产地杜仲雄花样品具有一定差异，根据变量投影重要性（variable importance in the projection,VIP）筛选出7个差异性成分；差异性成分峰面积结合气候因子的相关性分析结果显示9号峰峰面积与3、4月平均最低气温呈显著正相关，15号峰槲皮素峰面积与3月平均降水天数呈显著负相关，其余差异性成分与气候因子未呈现出明显的相关性。结论 该方法可应用于杜仲雄花的质量评价，为杜仲雄花质量控制与资源开发提供参考。