【摘 要】
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本研究旨在探究用DF1细胞替代DF1细胞上清对外源性禽白血病病毒(ALV)进行快速检测。采集ALVp27抗原阳性的地方品种百日鸡的抗凝血22份,阴性鸡的抗凝血2份,离心取白细胞接种DF
【基金项目】
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国家公益性行业(农业)科研专项(201203055)
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本研究旨在探究用DF1细胞替代DF1细胞上清对外源性禽白血病病毒(ALV)进行快速检测。采集ALVp27抗原阳性的地方品种百日鸡的抗凝血22份,阴性鸡的抗凝血2份,离心取白细胞接种DF1细胞培养,重复9块24孔细胞培养板。每隔24h取1块24孔板,分别收集细胞上清与DF1细胞于-20℃冻存,直至第9天,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测所有细胞上清与DF1细胞中的ALVp27抗原,并采用SPSS Statistics 17.0软件比较分析细胞上清与DF1细胞中ALVp27抗原S/P值的差异性与相关性。结果显示:培养8d的细胞上清中可检测到所有的15份阳性样品,而培养4d即可在DF1细胞中检出所有阳性样品(15份);15份外源性ALV样品在细胞上清中初始检出p27抗原阳性时,同一培养时间的DF1细胞中的S/P值均明显高于细胞上清中的S/P值,差异极显著(P<0.01);培养4～5d的DF1细胞与第9天收集的细胞上清中p27抗原S/P值相关性最高,分别为0.946、0.923。本研究显示,检测培养4～5d的DF1细胞中的ALVp27抗原与经典方法所要求的检测培养9d的细胞上清中的ALVp27抗原可达到相同的效果。
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