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目的
探讨去甲斑蝥素(NCTD)诱导胶质瘤细胞凋亡的分子机制。
方法不同浓度NCTD(25、50、100、200 μmol/L)分别处理胶质瘤C6细胞24、48 h，噻唑蓝(MTT)法检测药物对细胞的生长抑制作用；膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)染色法检测NCTD对C6细胞凋亡的影响；Western blot法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)家族蛋白的表达。
结果MTT法检测显示NCTD呈时间、剂量性抑制细胞增殖，处理24、48 h后半数抑制浓度(IC50)分别为96.5、48.7 μmol/L，对细胞增殖具有明显抑制作用(F＝78.202、897.714，P＝0.000)；流式细胞仪结果显示，10、30、50 μmol/L NCTD作用C6细胞10 h，细胞凋亡率分别(2.0±2.9)%、(8.4±4.1)%、(19.7±5.7)%，与对照组[(0.9±3.1)%]比较，差异有统计学意义(F＝76.246，P＝0.000)；Western blot结果显示，25、50、100 μmol/L处理C6细胞24 h后，细胞Bcl-2、Mcl-1蛋白的表达下调。
结论NCTD具有较强的抑制胶质瘤细胞生存和诱导凋亡作用，作用机制与通过诱导bcl-2家族抗凋亡蛋白表达下调，激活内源性线粒体凋亡通路有关。