目的:研究土鳖虫最佳醇提物制备工艺。方法:使用浸渍法和匀浆法用50%乙醇以浸提时间(4 h~4d)、温度(4~60℃)、料液比(4~12倍)和是否搅拌为因素,以提取物总获获得率和蛋白获获得率为指标提取土鳖虫;使用正交试验法优化浸渍法和匀浆法的提取条件;使用MTT法体外评价两种制备方法所得土鳖虫醇提物对MC3T3-E1成骨细胞促增殖作用的影响以探索土鳖虫最佳醇提物的制备工艺。结果:搅拌因素对两种方法获得的物质获得率均影响甚微;在不搅拌的状态下浸渍法获得的提取物获得率和总蛋白含量随温度升高而增加,料液比对匀浆法物质获得率影响较大;正交试验优选浸渍法最佳提取方案为以10倍量料液比在60℃条件下静置4 d,其总获得率为11%;匀浆法最佳方案为:以8倍量料液比在50℃条件下静置12 h,其总获得率为10.2%;匀浆法和浸渍法提取土鳖虫的总获得率无统计学差异,但匀浆法制得的提取物对MC3T3-E1成骨细胞的促增殖作用更明显,当用药浓度均为0.2 mg/mL时,匀浆法和浸渍法制备物的促细胞增殖率分别达到171.59%和48.45%。结论:优化后的两种方法制备物获得率差异不显著,但匀浆法所得提取物对MC3T3-E1成骨细胞的促增殖作用优于浸渍法。