【摘 要】
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目的 制备和筛选拮抗型人肿瘤坏死因子-α（hTNF-α）单克隆抗体（McAb）并检测其活性,为临床靶向治疗提供理论依据.方法 用经典免疫方法获得抗hTNF-α McAb,经接种于小鼠腹腔后获得
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（30400405）,天津市自然科学基金资助项目（05YFJZJC01200）.
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目的 制备和筛选拮抗型人肿瘤坏死因子-α（hTNF-α）单克隆抗体（McAb）并检测其活性,为临床靶向治疗提供理论依据.方法 用经典免疫方法获得抗hTNF-α McAb,经接种于小鼠腹腔后获得腹水,采用硫酸铵沉淀和蛋白G亲和层析法纯化得到纯度〉95%的抗hTNF-α McAb,采用ELISA方法测定效价、抗体亚型和亲和力,MTT法测定抗体阻断hTNF-α对L929细胞的细胞毒作用和筛选拮抗型抗hTNF-α McAb,流式细胞仪法测定抗体阻断hTNF-α诱导L929细胞凋亡的作用.结果 获得1株能稳定分泌抗
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