【摘 要】
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目的： 探究CRISPR/Cas9技术在建立亨廷顿病 （Huntington’ sDisease, HD） 原位敲入小鼠模型中的运用.方法： 首先, 设计gRNA靶点序列 （HttgRNA） 并检测其体外Cas9酶切活性, 选择活性
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目;项目编号:31472170
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目的： 探究CRISPR/Cas9技术在建立亨廷顿病 （Huntington’ sDisease, HD） 原位敲入小鼠模型中的运用.方法： 首先, 设计gRNA靶点序列 （HttgRNA） 并检测其体外Cas9酶切活性, 选择活性较好的一对备用.其次, 利用全基因合成具有150Q （150个CAG重复） 的Donor序列.然后将Cas9 mRNA,Htt-L3 gRNA,Htt-R3 gRNA 和DonorDNA混合均匀进行胚胎显微注射, 再将胚胎移植到受体小鼠中备孕.待小鼠出生后, 鉴定F0代及其子代
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