【摘 要】
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目的 探究苦瓜皂苷L对异丙肾上腺素诱导的大鼠H9c2心肌细胞肥大的保护作用及机制.方法 (1)体外培养大鼠H9c2心肌细胞,采用MTT法评价不同浓度的异丙肾上腺素(0.625、1.25、2.5、5、10 μmol·L-1)和不同浓度的苦瓜皂苷L(1.625、3.125、6.25、12.5、25.0 μg·mL-1)对心肌细胞活力的影响.(2)采用异丙肾上腺素诱导心肌细胞肥大模型.实验分为正常组、模型组、苦瓜皂苷L干预组和苦瓜皂苷L单独组.分别通过细胞拍照结合ImageJ软件测量、荧光定量PCR法考察苦瓜皂
【机 构】
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江西科技师范大学药学院,江西南昌330013;江西中医药大学中医基础理论分化发展研究中心,江西南昌330004
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目的 探究苦瓜皂苷L对异丙肾上腺素诱导的大鼠H9c2心肌细胞肥大的保护作用及机制.方法 (1)体外培养大鼠H9c2心肌细胞,采用MTT法评价不同浓度的异丙肾上腺素(0.625、1.25、2.5、5、10 μmol·L-1)和不同浓度的苦瓜皂苷L(1.625、3.125、6.25、12.5、25.0 μg·mL-1)对心肌细胞活力的影响.(2)采用异丙肾上腺素诱导心肌细胞肥大模型.实验分为正常组、模型组、苦瓜皂苷L干预组和苦瓜皂苷L单独组.分别通过细胞拍照结合ImageJ软件测量、荧光定量PCR法考察苦瓜皂苷L 12.5 μg·mL-1对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞表面积和心肌肥大相关胚胎基因ANP、β-MHC及α-SKA表达的影响.在此基础上,选择参与甘油磷脂代谢的酶Ⅵ组磷脂酶A2(PLA2G6)、二酰甘油激酶ζ(DGKZ)、甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶1(GPCPD1)为指标,评价苦瓜皂苷L对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞上述3种酶基因表达的影响;进一步以PLA2G6和DGKZ蛋白为指标,采用Western Blot法考察苦瓜皂苷L对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞PLA2G6和DGKZ蛋白表达的影响.结果 (1)与正常组比较,异丙肾上腺素(0.625～10μmol·L-1)和苦瓜皂苷L(1.625～25μg·mL-1)对心肌细胞活力没有明显影响(P＞0.05).本研究选用异丙肾上腺素10μmol.L-1和苦瓜皂苷L 12.5 μg·mL-1进行实验.(2)与正常组比较,模型组心肌细胞表面积增加(P＜0.05),心肌肥大相关胚胎基因ANP、β-MHC、α-SKA表达上调(P＜0.05),PLA2G6、DGKZ、GPCPD1 mRNA表达上调(P＜0.05),PLA2G6和DGKZ蛋白表达增加(P＜0.05);与模型组比较,苦瓜皂苷L干预组能够降低心肌细胞表面积(P＜0.05),下调心肌肥大相关胚胎基因 ANP、β-MHC、α-SKA 表达(P＜0.05),下调 PLA2G6、DGKZ、GPCPD1 mRNA 表达(P＜0.05),降低PLA2G6和DGKZ蛋白表达(P＜0.05).结论 苦瓜皂苷L可缓解异丙肾上腺素诱导的心肌细胞肥大,可能与其抑制甘油磷脂代谢酶PLA2G6和DGKZ的表达有关.
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