【摘 要】
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目的构建抑制端粒酶活性的siRNA表达载体.方法化学合成2段编码短发夹RNA序列的、靶向端粒酶hTERT基因的寡核苷酸,各64个碱基,退火,克隆到经BgIⅡ、HindⅢ双酶切同时CIP处理后
【机 构】
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四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室
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目的构建抑制端粒酶活性的siRNA表达载体.方法化学合成2段编码短发夹RNA序列的、靶向端粒酶hTERT基因的寡核苷酸,各64个碱基,退火,克隆到经BgIⅡ、HindⅢ双酶切同时CIP处理后的pSUPER载体的polⅢH1启动子的下游,重组构建RNAi质粒,同时设立非特异对照.结果重组构建的pSUP-hTE载体经双酶切电泳分析及插入基因片段序列分析,结果表明64个碱基成功插入到预计位点,并且序列完全一致.结论载体的成功构建,为进一步研究其对端粒酶活性的抑制作用打下基础.同时使我们发展了在体内合成siRNA
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