【摘 要】
：
目的 观察钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)对RAW264.7细胞炎症反应的影响,并探讨其分子机制.方法 采用Fura-2荧光探针对RAW264.7细胞质中Ca2+进行荧光染色,使用单细胞荧光钙离子检测仪检测CaSR对巨噬细胞内Ca2+信号的影响;采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导细胞炎症模型;采用q-PCR检测IL-1β和IL-18 mRNA表达;ELISA检测IL-1β蛋白含量.结果 CaSR激动剂CaCl2显著增加RAW264.7胞内
【机 构】
：
400014重庆,重庆医科大学附属儿童医院重症医学科,国家儿童健康与疾病临床医学研究中心,儿童发育疾病研究教育部重点实验室,儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地,儿科学重庆市重点实验室;400037重
论文部分内容阅读
目的 观察钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)对RAW264.7细胞炎症反应的影响,并探讨其分子机制.方法 采用Fura-2荧光探针对RAW264.7细胞质中Ca2+进行荧光染色,使用单细胞荧光钙离子检测仪检测CaSR对巨噬细胞内Ca2+信号的影响;采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导细胞炎症模型;采用q-PCR检测IL-1β和IL-18 mRNA表达;ELISA检测IL-1β蛋白含量.结果 CaSR激动剂CaCl2显著增加RAW264.7胞内钙荧光强度,而CaSR拮抗剂Calhex231可抑制此作用.CaCl2及cinacalcet(CaSR特异性激动剂)都能引起胞内Ca2+信号增加,此作用可被Calhex231及瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(transient receptor potential cation channel 6,TRPC6)抑制剂 SAR7334所抑制(P＜0.05).q-PCR检测结果显示:LPS组IL-1β和IL-18 mRNA表达显著高于对照组,cinacalcet进一步增加其表达,而Calhex231及SAR7334可显著抑制此作用(P＜0.05).ELISA结果显示:与LPS比较,cinacalcet 增加 IL-1β 蛋白分泌(P＜0.05),而此作用可被 Calhex231 及 SAR7334抑制(P＜0.05).结论 在巨噬细胞中,激活CaSR通过TRPC6引起胞内Ca2+浓度增加,进而促进IL-1β及IL-18的分泌,最终促进了可能的炎症反应.
其他文献
Standard machine-learning approaches involve the centralization of training data in a data center,where centralized machine-learning algorithms can be applied for data analysis and inference.However,due to privacy restrictions and limited communication re
目的 基于验案分析探讨柴胡桂枝干姜汤的方证特点与配伍规律.方法 检索瀚堂典藏中医药文献数据库和中国生物医学文献服务系统(SinoMed)中使用柴胡桂枝干姜汤的古今验案,用频次法计数文献中各验案的主要症状及用药情况,用因子分析和层次聚类分析其方证特点和用药配伍规律.结果 共纳入236篇文献,获得古代验案9个、现代文献验案227个.常见症状变量的因子分析显示,柴胡桂枝干姜汤验案症状可以分为少阳胆郁气滞症状、脾虚消化道症状、津液代谢失常湿盛和全身阳气不足症状4类;分层聚类分析显示,少阳郁滞、胆胃失和挟湿以及少阳
目的 了解髓过氧化物酶(MPO)-抗中性粒细胞胞质抗体相关性血管炎(AAV)患者血清中IgG4及辅助性T细胞(Th)1/Th2细胞因子的表达情况.方法 收集苏州大学附属第二医院50例AAV患者及40例同期健康体检者的血清样本,采用免疫比浊法测定IgG水平,采用ELISA法测定IgG4水平,采用流式细胞术微球阵列(CBA)技术检测血清中Th1/Th2细胞因子的水平,比较两组样本上述指标的差异,分析不同指标之间的相关性.结果 共收集到50例AAV患者血清样本,其中MPO-AAV患者40例(80.0％).MPO
1 病例资料 患者女,45岁,因“反复心慌、乏力 1年余”于2020年12月7日就诊于海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院心血管内科.既往于当地多家医院就诊.当地医院12导联心电图及动态心电图均提示心房颤动(以下简称房颤)伴室内传导阻滞、频发室性早搏;心脏彩色多普勒超声示双房、左心室扩大(左心室舒张末期内径6.5 cm),二尖瓣中量反流,三尖瓣中大量反流,左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)为30％;冠状动脉造影阴性.根据心脏超声检查结果,在
目的 研究脊髓呼吸相关的膈运动神经元的空间分布位置并比较其与三角肌运动神经元和肋间运动神经元的分布特点差异.方法 采用从外周到中枢的逆行示踪研究策略,在成年小鼠(n=3)同侧膈肌、三角肌、肋间肌微量注射霍乱毒素β亚基(cholera toxin β-subunit,CTB)或伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV),逆行标记支配目标肌肉的脊髓运动神经元,并进一步分析、比较不同脊髓运动神经元的分布特征.结果 CTB和PRV介导的逆行示踪结果显示:成年小鼠膈运动神经元分布在颈髓C3～C6节段
目的 探索stathmin在肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激模拟的创面愈合早期炎症反应中,对皮肤成纤维细胞迁移的作用及初步机制.方法 TNF-α刺激人真皮成纤维细胞模拟体外创面愈合早期炎症反应,通过免疫荧光观察TNF-α对伪足生成的影响,细胞划痕实验观察迁移的改变,免疫荧光及Western blot观察TNF-α对stathmin表达的影响;细胞松弛素B刺激细胞和小干扰RNA(siSTMN)干扰stathmin表达后,通过免疫荧光观察伪足的改变,细胞划痕实验观察迁移的变化.结果 TNF-α处理人真皮成纤维
目的 探讨环状RNAcircACTN4(hsa_circ_0050900)在乳腺癌中的表达及其对乳腺癌细胞增殖、侵袭和转移的影响.方法 利用环状RNA芯片分析4对乳腺癌组织和癌旁组织的circRNA表达谱,并用实时荧光定量PCR验证circACTN4的相对表达水平;用circACTN4过表达质粒及对照质粒分别转染乳腺癌细胞MCF-7/MDA-MB-231,采用CCK-8实验、EdU实验、平板克隆实验、细胞划痕实验、Transwell迁移和侵袭实验研究circACTN4在乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭中的作用;
目的 探究大黄素抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)生物膜作用及其机制.方法 微量肉汤稀释法测定大黄素对MRSA标准株及5种不同地区临床分离株的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC),绘制抑菌曲线评估其动态抑菌效果;结晶紫染色测定大黄素抑制MRSA生物膜的作用,扫描电镜和激光
目的 构建一种基于三维刚性DNA桥式纳米探针(3D-TPN)的光电化学(photoelectro-chemistry,PEC)传感器,用于DNA甲基化位点分析研究.方法 将二氧化钛(TiO2)悬浮液滴加到ITO电极表面,形成薄膜,通过电位溶出法在TiO2纳米膜表面沉积金纳米粒子(AuNPs),进一步通过Au-S将三维刚性DNA桥式探针固载到电极表面.制备5-甲基胞嘧啶抗体和碲化镉量子点(Ab-CdTe QDs)偶联物.靶序列存在时,5-甲基胞嘧啶与抗体特异性结合,使Ab-CdTe QDs连接到电极表面,与
目的 在前期发现具有肿瘤靶向性的吲哚花菁小分子的结构基础上,对其进行聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)水溶性修饰,并评价其理化性质和肿瘤靶向光动力治疗作用.方法 分别以2,3,3-三甲基吲哚、聚乙二醇单甲醚为原料,设计并化学合成PEG修饰吲哚花菁小分子,采用核磁氢谱、质谱等检测、表征其化学结构;通过水溶性比较、光学性质表征、肾脏正常细胞HK-2与肿瘤细胞RENCA摄入比较、细胞活力测试、单线态氧以及细胞活性氧测定等,评价其理化性质与肿瘤靶向光动力作用.结果 通过汇聚合成策略,经过6