目的:建立一种测定灵芝提取物中尿苷和腺苷含量的高效液相色谱法,测定不同产地灵芝提取物中的尿苷和腺苷的含量。方法:色谱柱:Diamonsil C18(2)(5μm,250 mm×4.6 mm);流动相:乙腈-0.04 M KH2PO4=9∶91;流速:1 mL·min-1,检测波长:260 nm,柱温:35℃。结果:尿苷和腺苷分别在0.2~50μg·mL-1和0.1~20μg·mL-1范围内,峰面积与浓度的线性关系良好;尿苷和腺苷的平均准确度均在99.91%~102.12%之间;日内、日间精密度RSD均小于1.76%,样品回收率均在94.42%~100.50%之间。6个不同产地的灵芝提取物中,以福建灵芝中尿苷含量和吉林灵芝中腺苷含量最高,其他5个产地灵芝中尿苷和腺苷含量差异无统计学意义。结论:该方法特异性强、准确度高、重复性好,可用于测定灵芝提取物中的尿苷和腺苷含量,为灵芝提取物的评价提供参考和依据。