泡球蚴体外培养方法的改进及培养产物的初步鉴定

来源 :中国病原生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:vincent1115
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目的对泡球蚴体外培养模型进行改进,并对培养产物进行初步鉴定。方法培养肝癌细胞(Bel7404),留取细胞上清液。取泡球蚴组织,用含肝癌细胞培养上清的DMEM完全培养基于37℃5%CO2培养箱中培养27 d。实验期间对囊泡进行计数,观察囊泡生长情况,记录囊泡最大、最小直径,绘制生长曲线。培养结束后,取培养囊泡壁及其囊液分别进行DNA鉴定和蛋白定量。结果泡球蚴在含肝癌细胞上清液的DMEM中能生长,囊泡直径0.5~5.0mm;囊液蛋白含量为1.8 mg/ml,囊壁DNA经PCR扩增出Em特异性200 bp条带。结论1)泡球蚴体外生长因素可不依赖培养细胞本身;2)由于体外与动物体内的培养环境的不同,可能引起囊泡内囊液的蛋白含量有所差异;3)DNA检测证明培养产物为泡球蚴;4)利用肝癌细胞上清液建立泡球蚴体外培养改良模型具有一定的可行性。
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